一种具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法

admin管理员组

文章数量:866648

本发明公开了一种具有辅助改善记忆功能的颗粒的制备方法，首先利用超临界二氧化碳萃取技术制备蚕蛹毛油，并通过多级分子蒸馏精制技术在富集蚕蛹油中的α-亚麻酸的同时脱除杂质和异味，获得色泽和风味俱佳的蚕蛹精油，脱油后的蚕蛹渣则利用超声法提取制备蚕蛹蛋白粉；其次集成超声-微波协同萃取，获得高纯度金针菇粗多糖；最后以蚕蛹精油制备芯材，金针菇粗多糖提取物和蚕蛹蛋白粉制备壁材，复配乳化剂高压均质后喷雾干燥制得微胶囊粉末，经干法制粒工艺制备成40-60目的颗粒。药理实验表明，本发明制备的颗粒具有辅助改善动物记忆功能的作用，可应用于辅助改善记忆功能食品方面。

1.一种具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)蚕蛹精油的制备：①提取：取缫丝蚕蛹60-70℃恒温烘干至含水量低于6%，粉碎过20-40目筛，送入超临界二氧化碳萃取釜中，控制萃取压力25MPa，萃取温度45℃，时间2-4h，得蚕蛹毛油，剩余的蚕蛹渣待用；②精制：提取的蚕蛹毛油采用五级分子蒸馏精制，控制温度为110-160℃，压力为1.5-20Pa，得α-亚麻酸富集的蚕蛹精油；(2)蚕蛹蛋白粉的制备：蚕蛹渣经超声辅助提取蚕蛹蛋白，控制超声波频率为30-40kHz，料液比1∶8-1∶10，提取时间30min，提取液浓缩至固形物为15-20%后喷雾干燥即得蚕蛹蛋白粉；（3）金针菇粗多糖提取物：金针菇干燥至恒重后粉碎，过60-80目筛，以水为溶剂，控制料液比1∶45，利用超声-微波协同萃取获得金针菇粗多糖提取液，经80%乙醇沉淀和冷冻干燥获得金针菇粗多糖提取物；（4）微胶囊化：以蚕蛹精油为芯材，金针菇粗多糖提取物和蚕蛹蛋白粉按重量比3∶1混合作为壁材，将芯材与壁材按重量比1∶1-1∶2配比，同时加入占芯材和壁材总重量6-8%的复合乳化剂进行高压均质乳化，调节总固形物的重量含量为5-8%，混匀，喷雾干燥后即得微胶囊粉末；（5）制粒：将微胶囊粉末中添加总重10-15%的麦芽糊精和1-1.5%的硬脂酸镁混匀干法制粒，经40-60目筛整粒、干燥，即得颗粒。 2.根据权利要求1所述一种具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述蚕蛹精油的α-亚麻酸含量大于80%。 3.根据权利要求1所述一种具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述复合乳化剂为辛烯基琥珀酸淀粉酯NDC和阿拉伯胶的混合物，其重量比为1∶1-2∶1。

技术领域

本发明涉及食品加工领域，具体涉及一种具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法。

背景技术

缫丝蚕蛹是指绢丝厂将蚕茧剥离后残留的蚕蛹，其营养价值非常高，是国家卫生部批准的“作为普通食品管理的食品新资源名单”中唯一的昆虫类食品，但作为传统丝绸加工的副产物，缫丝蚕蛹仅用来加工饲料，利用十分有限。鲜蚕蛹中粗蛋白含量16.67%、粗脂肪含量11.49%，是一种优质的植物蛋白资源，可用加工高附加值的蚕蛹蛋白粉和蚕蛹油。

α-亚麻酸，即9,12,15-十八碳三烯酸，是一种高级多不饱和脂肪酸，其在蚕蛹油中含量可达35.2%，经纯化富集后可达到80%以上。α-亚麻酸人体自身无法合成，它是维系人类脑进化的核心物质，其代谢历程的终端将形成二十碳五烯酸(C20:5)和二十二碳六烯酸(C22:6)，即EPA和DHA ，这两者都是组成神经细胞膜的重要成分，具有促进神经系统发育、提高记忆力和视网膜反射能力、预防老年痴呆症、预防癌症和抗过敏症等功效。

金针菇隶属担子菌亚门(Basidiomycotina)层菌纲(Hymenomycetes)伞菌目(Agaricales)口菌科(Tricholomatacea)金钱线属(Flammulina)，早在元代的《农书》上对其就有过详细记载。金针菇形美、味鲜，并含有多种功能成分，故被广泛用于各种药膳，是世界著名的食药两用菌及观赏菌。有研究表明，干金针菇中含多糖l％～2％，蛋白质8.39％～11.80％，高于一般菇类。此外，金针菇中还含有与智力发育有关的无机元素锌，享有“增智菇”的美誉。金针菇多糖是金针菇的主要活性成分，关于其对学习记忆能力的影响已有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法。

为实现本发明的目的，本发明提供的具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法，它包括以下步骤：

(1) 富含α-亚麻酸的蚕蛹精油的制备：

①提取：取缫丝蚕蛹60-70℃恒温烘干至含水量低于6%，粉碎过20-40目筛，送入超临二氧化碳萃取釜中，控制萃取压力25MPa，萃取温度45℃，时间2-4h，得蚕蛹毛油，剩余的蚕蛹渣待用；

②精制：提取的蚕蛹毛油采用五级分子蒸馏精制，控制温度为110-160℃，压力为1.5-20Pa，得α-亚麻酸富集的蚕蛹精油；

(2) 蚕蛹蛋白粉的制备：蚕蛹渣经超声辅助提取蚕蛹蛋白，控制超声波频率为30-40kHz，料液比1:8-1:10，提取时间30min，提取液浓缩至固形物为15-20%后喷雾干燥即得蚕蛹蛋白粉；

（3）金针菇粗多糖提取物：金针菇干燥至恒重后粉碎，过60-80目筛，以水为溶剂，控制料液比1∶45，利用超声-微波协同萃取获得金针菇粗多糖提取液，经80%乙醇沉淀和冷冻干燥获得金针菇粗多糖提取物；

（4）微胶囊化：以富含α-亚麻酸的蚕蛹精油为芯材，金针菇粗多糖提取物和蚕蛹蛋白粉按重量比3∶1混合作为壁材，将芯材与壁材按重量比1∶1-1∶2配比，同时加入占芯材和壁材总重量6-8%的复合乳化剂进行高压均质乳化，调节总固形物的重量含量为 5-8%，混匀，喷雾干燥后即得微胶囊粉末；

（5）制粒：微胶囊粉末中添加总重10-15%的麦芽糊精和1-1.5%的硬脂酸镁混匀干法制粒，经40-60目筛整粒、干燥，即得颗粒。

在上述制备方法中：

步骤（1）中所述蚕蛹精油的α-亚麻酸含量大于80%。

步骤（3）中所述超声-微波协同萃取的超声波功率为30kHz，微波功率为250 W，时间为90 s。

步骤（4）中所述复合乳化剂为辛烯基琥珀酸淀粉酯NDC和阿拉伯胶的混合物，其重量比为1∶1-2∶1。

本发明提供的具有辅助改善记忆功能的颗粒制备方法，具有以下优点：

1、以丝绸加工下脚料——缫丝蚕蛹为原料，利用超临界二氧化碳萃取技术制备蚕蛹毛油，并通过五级分子蒸馏精制技术富集α-亚麻酸，而后对脱油后蚕蛹渣进行超声辅助提取蚕蛹蛋白，实现缫丝蚕蛹的综合全利用，蚕蛹精油中α-亚麻酸富集达到80%以上，低分子饱和脂肪酸和低分子易氧化成腥味的物质被有效除去，过氧化值和酸值有效降低，获得色泽和风味俱佳的蚕蛹精油。

2、集成超声-微波协同萃取工艺和冷冻干燥技术，获得高纯度、高活性的金针菇粗多糖，并复配蚕蛹蛋白粉制备微胶囊壁材，替代传统微胶囊壁材以淀粉或糊精为原料，进一步保证了颗粒的功能活性。

3、微胶囊后增加干法制粒工艺获得颗粒制剂，保证了产品的稳定性高、流动性，便于运输、生产、保存。

4、该颗粒产品在制备过程中不接触有毒、有害溶剂，各操作单元均控制在高真空和低温条件下瞬时完成进行，有效地避免了活性成分的氧化、分解、聚合，动物实验有效证明其具有改善记忆功能，可应用于具有辅助改善记忆功能食品方面。

具体实施方式：

实施例一：

(1) 富含α-亚麻酸的蚕蛹精油的制备方法：

①提取：取缫丝蚕蛹70℃恒温烘干至含水量低于6%，粉碎过40目筛，送入超临二氧化碳萃取釜中，控制萃取压力25MPa，萃取温度45℃，时间4h，得蚕蛹毛油，剩余的蚕蛹渣待用。

②精制：提取的蚕蛹毛油采用五级分子蒸馏精制，控制温度为110℃，压力为1.5Pa，得α-亚麻酸含量大于80%蚕蛹精油。

蚕蛹蛋白粉的制备方法：蚕蛹渣经超声辅助提取蚕蛹蛋白，控制超声波频率为30kHz，料液比1∶10，提取时间30min，提取液浓缩至固形物为20%后喷雾干燥即得蚕蛹蛋白粉。

（3）金针菇粗多糖提取物：金针菇干燥至恒重后粉碎，过60目筛，以水为溶剂，利用超声-微波协同萃取提取金针菇粗多糖，控制料液比1∶45，超声波功率为30kHz，微波功率为250 W，时间为90 s。提取液经80%乙醇沉淀和冷冻干燥获得金针菇粗多糖提取物。

（4）微胶囊化：以富含α-亚麻酸的蚕蛹精油为芯材，金针菇粗多糖提取物和蚕蛹蛋白粉按重量比3∶1混合作为壁材，将芯材与壁材按重量比1∶1配比，同时加入占芯材和壁材总重量8%的复合乳化剂进行高压均质乳化，复合乳化剂为辛烯基琥珀酸淀粉酯NDC和阿拉伯胶按重量比为2∶1混合，调节总固形物的重量含量为8%，混匀，喷雾干燥后即得微胶囊粉末。

（5）制粒：微胶囊粉末中添加总重10%的麦芽糊精和1%的硬脂酸镁混匀干法制粒，经40目筛整粒、干燥，即得颗粒。

实施例二：

(1) 富含α-亚麻酸的蚕蛹精油的制备方法：

①提取：取缫丝蚕蛹60℃恒温烘干至含水量低于6%，粉碎过20目筛，送入超临二氧化碳萃取釜中，控制萃取压力25MPa，萃取温度45℃，时间2h，得蚕蛹毛油，剩余的蚕蛹渣待用。

②精制：提取的蚕蛹毛油采用五级分子蒸馏精制，控制温度为160℃，压力为20Pa，得α-亚麻酸含量大于80%蚕蛹精油。

蚕蛹蛋白粉的制备方法：蚕蛹渣经超声辅助提取蚕蛹蛋白，控制超声波频率为40kHz，料液比1∶8，提取时间30min，提取液浓缩至固形物为15%后喷雾干燥即得蚕蛹蛋白粉。

（3）金针菇粗多糖提取物：金针菇干燥至恒重后粉碎，过80目筛，以水为溶剂，利用超声-微波协同萃取提取金针菇粗多糖，控制料液比1∶45，超声波功率为30kHz，微波功率为250 W，时间为90 s。提取液经80%乙醇沉淀和冷冻干燥获得金针菇粗多糖提取物。

（4）微胶囊化：以富含α-亚麻酸的蚕蛹精油为芯材，金针菇粗多糖提取物和蚕蛹蛋白粉按重量比3∶1混合作为壁材，将芯材与壁材按重量比1∶2配比，同时加入占芯材和壁材总重量6%的复合乳化剂进行高压均质乳化，复合乳化剂为辛烯基琥珀酸淀粉酯NDC和阿拉伯胶按重量比为1∶1混合，调节总固形物的重量含量为5%，混匀，喷雾干燥后即得微胶囊粉末。

（5）制粒：微胶囊粉末中添加总重15%的麦芽糊精和1.5%的硬脂酸镁混匀干法制粒，经60目筛整粒、干燥，即得颗粒。

实施例三：

(1) 富含α-亚麻酸的蚕蛹精油的制备方法：

①提取：取缫丝蚕蛹65℃恒温烘干至含水量低于6%，粉碎过40目筛，送入超临二氧化碳萃取釜中，控制萃取压力25MPa，萃取温度45℃，时间3h，得蚕蛹毛油，剩余的蚕蛹渣待用。

②精制：提取的蚕蛹毛油采用五级分子蒸馏精制，控制温度为140℃，压力为10Pa，得α-亚麻酸含量大于80%蚕蛹精油。

蚕蛹蛋白粉的制备方法：蚕蛹渣经超声辅助提取蚕蛹蛋白，控制超声波频率为40kHz，料液比1∶8，提取时间30min，提取液浓缩至固形物为15%后喷雾干燥即得蚕蛹蛋白粉。

（3）金针菇粗多糖提取物：金针菇干燥至恒重后粉碎，过80目筛，以水为溶剂，利用超声-微波协同萃取提取金针菇粗多糖，控制料液比1∶45，超声波功率为30kHz，微波功率为250 W，时间为90 s。提取液经80%乙醇沉淀和冷冻干燥获得金针菇粗多糖提取物。

（4）微胶囊化：以富含α-亚麻酸的蚕蛹精油为芯材，金针菇粗多糖提取物和蚕蛹蛋白粉按重量比3∶1混合作为壁材，将芯材与壁材按重量比1∶2配比，同时加入占芯材和壁材总重量6%的复合乳化剂进行高压均质乳化，复合乳化剂为辛烯基琥珀酸淀粉酯NDC和阿拉伯胶按重量比为1∶1混合，调节总固形物的重量含量为5%，混匀，喷雾干燥后即得微胶囊粉末。

（5）制粒：微胶囊粉末中添加总重12%的麦芽糊精和1%的硬脂酸镁混匀干法制粒，经40目筛整粒、干燥，即得颗粒。

药效试验：

1 试验材料

(1)   受试样品：辅助改善记忆功能的颗粒按上述实施例一制备，以下暂命名CJ颗粒。

(2)   试剂：氢溴酸东莨菪碱、脑复新片（盐酸吡硫醇片）、无水葡萄糖等。

(3)   仪器：避暗视频分析系统、水迷宫游泳箱

2 分组与造模  清洁级SD大鼠和KM小鼠．

造模方法：从试验一周开始。除正常对照组腹腔注射等量的生理盐水外。其它各试验组每天试验前（各组灌胃给药30 min后）对小（大）鼠均腹腔注射东莨菪碱2 mg/kg，直到试验结束。

给药方法：SD大鼠和KM小鼠随机被分为5组，即：正常对照组、模型组、脑复新组以及低剂量、高剂量组，每组10只。试验前连续5 d按0.1 mL/10 g·bw剂量分别灌胃生理盐水、生理盐水、脑复新80mg/(kg·bw·d)、CJ 250mg/(kg·bw·d)、500mg/(kg·bw·d)。

统计学处理

采用SSPS软件数据处理，对多组均数进行方差齐性检验（方差不齐时经变量转换达到方差齐性）和单因素方差分析。采用LSD法比较各组间差异。P＜0.05为显著水平。

试验结果

4.1 CJ颗粒对记忆障碍型小鼠避暗试验的影响

由表l可知，与空白对照组相比，记忆障碍模型组小鼠避暗潜伏期明显缩短缩短，错误次数明显增加，明箱停留时间显著降低，说明记忆障碍模型造模成功。各试验组通过灌胃给予脑复新和不同剂量的CJ颗粒后，小鼠避暗潜伏期均得到延长，CJ颗粒高剂量和低剂量组治疗效果与脑复新相当(P<0.05)。

就避暗错误次数而言，通过灌胃不同剂量CJ颗粒及脑复新后，小鼠错误次数相应减少，其中低剂量组、脑复新避暗错误次数与模型组相当(P＞0.05)，高剂量组效果与模型组差异显著(P＜0.05)，但与正常对照组相比还存在差异(P＜0.05)。

通过灌胃不同剂量CJ颗粒及脑复新后，高剂量组和脑复新组小鼠明箱停留时间均得到延长，与模型组具有显著性差异(P<0.05)，与正常对照组相比均无显著性差异(P<0.05)。就明箱停留时间而言，高剂量组的治疗可以促进记忆障碍模型小鼠的学习记忆能力恢复至正常小鼠的水平(P＞0.05)，而低剂量组与模型组差异不显著，说明CJ颗粒对小鼠记忆功能改善存在剂量关系。

CJ颗粒对记忆障碍型大鼠水迷宫试验的影响

由表2可知，与正常对照组相比，记忆障碍模型组大鼠水迷宫水中潜伏期明显延长，游泳总路程明显延长(P<0.05)，显示造模成功。通过灌胃不同剂量CJ颗粒及脑复新后，大鼠潜伏期均缩短，游泳总路程均增加，其中高剂量组和脑复新组与模型组均存在著性差异(P<0.05)，两者治疗效果相当。而低剂量组潜伏期和游泳总路程与模型组相比不存在统计学差异，说明在设定的给药剂量范围，高剂量组与低剂量组治疗效果存在剂量关系。

结论

通过灌胃不同剂量CJ颗粒及脑复新对小鼠避暗试验和大鼠水迷宫试验的影响表明，CJ颗粒高剂量组的治疗可延长记忆障碍模型小鼠避暗潜伏期和明箱停留时间，减少记忆障碍模型小鼠避暗错误次数以及记忆障碍模型大鼠的潜伏期和游泳上台总路程。试验结果与模型组相比具有显著性差异(P<0.05)，治疗效果优于脑复新或与之相当。说明本颗粒能有效辅助改善氢溴酸东莨菪碱诱导的记忆障碍模型小鼠、大鼠的学习记忆能力，且与之存在剂量关系。

本发明的实施方式不限于此，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，本发明还具有多种形式的修改、替换或变更，均落在本发明权利保护范围之内。

本文标签： 颗粒制备方法记忆功能