复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法

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本发明涉及一种复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，本发明将香菇和平菇液体菌种进行混合，于富含锌、硒的发酵培养基中发酵得到复合菌丝体，无机硒、无机锌进入菌丝体后经生物转化为有机硒和有机锌，促进氨基酸和蛋白质合成，将该复合菌丝体添加到猪饲料中，不仅提高了猪饲料的风味，提高饲料的适口性，而且可以满足猪的营养需要，在食用饲料的同时补充营养，有机硒、有机锌更容易被吸收，也促进猪体内对微量元素的吸收，弥补了吸收量不足或不平衡引起的疾病或生理异常，提高猪的免疫力，另外，本发明所制备的猪饲料原料简单易得，成本低、绿色环保，无药物残留等问题。

1.复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)发酵培养基的制备：发酵培养基的配方具体为：亚硒酸钙2～4.2g/L，(NH)SO4～6g/L，谷氨酸2～4g/L，KHPO5～8g/L，ZnSO·7HO0.1～0.8g/L，蛋白胨1～15g/L，葡萄糖10～20g/L，酵母膏1～10g/L，MgSO·7HO0.5～1.1g/L，VB0.1～0.5g/L，Vc0.5～1.0g/L，水1000ml，pH7.5～8，121℃高温灭菌；(2)干菌丝体的制备：将香菇液体菌种和平菇液体菌种按照体积比1:2于发酵培养基中培养，得到含菌丝体的发酵液；将菌丝体与发酵液于2000～10000rpm分离，收集菌丝体，烘干至含水量低于5～8％，得到干菌丝体；(3)原料混合：将干菌丝体、玉米粉、大麦粉、卡拉胶、食盐、米糠按照质量比(1～3)：(20～25)：(30～35)：(8～10)：(4～6)：(10～15)称取，粉碎至100～150目，于混合机均匀混合，得到富含硒、锌复合食用菌菌丝体的猪饲料。 2.根据权利要求1所述的复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，其特征在于，发酵培养基的配方为：亚硒酸钙3.5g/L，(NH)SO5g/L，谷氨酸3g/L，KHPO6g/L，ZnSO·7HO0.8g/L，蛋白胨15g/L，葡萄糖20g/L，酵母膏10g/L，MgSO·7HO1.1g/L，VB0.3g/L，Vc1.0g/L，水1000ml，pH7.5～8，121℃高温灭菌。 3.根据权利要求1所述的复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)接种量为5～10％(v/v)。 4.根据权利要求1所述的复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中发酵培养温度为32～35℃，培养时间为16～18h。 5.根据权利要求1所述的复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)发酵培养基冷却至20～35℃，再进行发酵培养。 6.根据权利要求1所述的复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，其特征在于，所述香菇液体菌种按下述方法制得：将香菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，吐温802ml，MgSO·7HO0.6g，MnSO·4HO0.1g，KHPO1.5g，水1000ml，pH6.2～6.4；115℃高温灭菌15min，备用。 7.根据权利要求1所述的复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，其特征在于，所述平菇液体菌种按下述方法制得：将平菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏8g，葡萄糖20g，乙酸钠3g，吐温801ml，水1000ml，pH6.8～7；115℃高温灭菌15min，备用。

技术领域

本发明涉及畜禽养殖领域，特别涉及一种复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法。

背景技术

近年来，畜牧业的发展迅速，动物饲料中抗生素、化学合成药物及激素面临泛滥使用的问题，虽然畜禽生长率提高了，但是随之带来的药物残留问题日益严重，直接危害人体健康，使畜禽产品品质下降。随着消费者对食品安全、卫生、健康等问题日益关注，对畜产品品质的要求越来越高，因此，无污染、无残留和无公害的安全绿色食品已成为人们追求的目标。

猪饲料领域已开始尝试各种类型的绿色添加剂，比如中药复方添加剂，而对于仔猪或母猪属于体质差、免疫力低下的种类，大部分由于患有蓝耳病、呼吸道疾病等致死，造成农场的巨大损失。锌可以维持中枢神经系统代谢、骨骼代谢同时具有提高免疫力的功能，硒可以参与动物机体免受自由基和辐射等破坏，刺激免疫反应，抑制癌细胞等作用，无机硒已逐渐从动物饲料中消失，取代之的是有机硒作为硒源，虽然，有机硒在饲料中已开始应用，但是单一微量元素的存在，但仅能在动物体内补充一种微量元素。因此，通过同时补入锌、硒可以有效弥补由于单一微量元素造成的缺陷。食用菌菌丝体具有含有丰富的活性真菌多糖，且都有不同程度的抑癌、防癌、抗氧化作用，部分食用菌还含有活性蛋白、活性多肽、三萜化合物、甾体化合物、硒、有机锗等活性成分。

中国专利申请CN 103535543A提供了一种仔猪成长精饲料，该申请中使用了昂贵的灵芝菌丝体作为添加剂，增加了生产成本，而且，该成长精饲料中不含有微量元素，不能更好的提高猪免疫力。

发明内容

本发明为解决现有技术中，猪饲料中微量元素单一、吸收不佳、营养成分不高的问题，提供了一种复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法。该饲料具有提高猪免疫力、促进猪生长、改善饲料风味、提高饲料适口性，绿色环保等优点。

为解决上述问题，本发明的技术要点是：复合食用菌菌丝体的猪饲料的制备方法，包括以下步骤：

(1)发酵培养基的制备：发酵培养基的配方具体为：亚硒酸钙2～4.2g/L，(NH4)2SO4 4～6g/L，谷氨酸2～4g/L，KH2PO4 5～8g/L，ZnSO4·7H2O 0.1～0.8g/L，蛋白胨1～15g/L，葡萄糖10～20g/L，酵母膏1～10g/L，MgSO4·7H2O 0.5～1.1g/L，VB60.1～0.5g/L，Vc 0.5～1.0g/L，水1000ml，pH7.5～8，121℃高温灭菌；

(2)干菌丝体的制备：将香菇液体菌种和平菇液体菌种按照体积比1:2于发酵培养基中培养，得到含菌丝体的发酵液；将菌丝体与发酵液于2000～10000rpm分离，收集菌丝体，烘干至含水量低于5～8％，得到干菌丝体；

(3)原料混合：将干菌丝体、玉米粉、大麦粉、卡拉胶、食盐、米糠按照质量比(1～3)：(20～25)：(30～35)：(8～10)：(4～6)：(10～15)称取，粉碎至100～150目，于混合机均匀混合，得到富含硒、锌复合食用菌菌丝体的猪饲料。

培养基是食用菌赖以生存的各种营养物质之所在，在使用品种和生长环境条件相同的情况下，使用基质不同、配方不同、基质的处理方式不同，香菇(拉丁文学名Lentinus edodes(Berk.)sing)和平菇(拉丁文学名Pleurotus ostreatus)的产量和质量等都有所差别。碳源将现有技术中的蔗糖替换为葡萄糖，更有利于菌体的吸收，添加酵母膏有利于氨基酸等代谢产物的生成。

优选的，发酵培养基的配方为：亚硒酸钙3.5g/L，(NH4)2SO45g/L，谷氨酸3g/L，KH2PO4 6g/L，ZnSO4·7H2O 0.8g/L，蛋白胨15g/L，葡萄糖20g/L，酵母膏10g/L，MgSO4·7H2O 1.1g/L，VB6 0.3g/L，Vc 1.0g/L，水1000ml，pH7.5～8，121℃高温灭菌。

进一步的，所述步骤(2)接种量为5～10％(v/v)。

进一步的，所述步骤(2)中发酵培养温度为32～35℃，培养时间为16～18h。

进一步的，所述步骤(2)发酵培养基冷却至20～35℃，再进行发酵培养。

进一步的，所述香菇液体菌种按下述方法制得：将香菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，吐温80 2ml，MgSO4·7H2O 0.6g，MnSO4·4H2O 0.1g，K2HPO4 1.5g水1000ml，pH 6.2～6.4；115℃高温灭菌15min，备用。

进一步的，所述平菇液体菌种按下述方法制得：将平菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏8g，葡萄糖20g，乙酸钠3g，吐温80 1ml，水1000ml，pH 6.8～7；115℃高温灭菌15min，备用。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明将香菇和平菇液体菌种进行混合，于富含锌、硒的发酵培养基中发酵得到复合菌丝体，无机硒、无机锌进入菌丝体后经生物转化为有机硒和有机锌，促进氨基酸和蛋白质合成，将该复合菌丝体添加到猪饲料中，不仅提高了猪饲料的风味，提高饲料的适口性，而且可以满足猪的营养需要，在食用饲料的同时补充营养，有机硒、有机锌更容易被吸收，也促进猪体内对微量元素的吸收，弥补了吸收量不足或不平衡引起的疾病或生理异常，提高猪的免疫力，另外，本发明所制备的猪饲料原料简单易得，成本低、绿色环保，无药物残留等问题。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明详细描述，如无特殊说明，本发明所涉及的原料均市售可得。

实施例1

(1)发酵培养基的制备：发酵培养基的配方具体为：亚硒酸钙2g/L，(NH4)2SO4 6g/L，谷氨酸2g/L，KH2PO4 5g/L，ZnSO4·7H2O 0.1g/L，蛋白胨15g/L，葡萄糖20g/L，酵母膏10g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，VB6 0.1g/L，Vc 1.0g/L，水1000ml，pH7.5，121℃高温灭菌；

(2)干菌丝体的制备：将香菇液体菌种和平菇液体菌种按照体积比1:2于发酵培养基中培养，接种量为5％(v/v)，发酵培养温度为32℃，培养时间为16～18h。得到含菌丝体的发酵液；将菌丝体与发酵液于2000rpm分离，收集菌丝体，烘干至含水量低于5％，得到干菌丝体；

所述香菇液体菌种按下述方法制得：将香菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，吐温80 2ml，MgSO4·7H2O 0.6g，MnSO4·4H2O 0.1g，K2HPO4 1.5g水1000ml，pH 6.4； 115℃高温灭菌15min，备用。

所述平菇液体菌种按下述方法制得：将平菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏8g，葡萄糖20g，乙酸钠3g，吐温80 1ml，水1000ml，pH 6.8；115℃高温灭菌15min，备用。

(3)原料混合：将干菌丝体30g、玉米粉200g、大麦粉300g，卡拉胶80g、食盐60g，米糠150g粉碎至150目，于混合机均匀混合，得到富含硒、锌复合食用菌菌丝体的猪饲料。

实施例2

(1)发酵培养基的制备：发酵培养基的配方具体为：亚硒酸钙3.5g/L，(NH4)2SO4 5g/L，谷氨酸3g/L，KH2PO4 6g/L，ZnSO4·7H2O 0.8g/L，蛋白胨15g/L，葡萄糖20g/L，酵母膏10g/L，MgSO4·7H2O 1.1g/L，VB6 0.3g/L，Vc 1.0g/L，水1000ml，pH7.5，121℃高温灭菌。

(2)干菌丝体的制备：将香菇液体菌种和平菇液体菌种按照体积比1:2于发酵培养基中培养，接种量为5％(v/v)，发酵培养温度为35℃，培养时间为16～18h。得到含菌丝体的发酵液；将菌丝体与发酵液于2000rpm分离，收集菌丝体，烘干至含水量低于5％，得到干菌丝体；

所述香菇液体菌种按下述方法制得：将香菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，吐温80 2ml，MgSO4·7H2O 0.6g，MnSO4·4H2O 0.1g，K2HPO4 1.5g水1000ml，pH 6.2；115℃高温灭菌15min，备用。

所述平菇液体菌种按下述方法制得：将平菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏8g，葡萄糖20g，乙酸钠3g，吐温80 1ml，水1000ml，pH 6.8；115℃高温灭菌15min，备用。

(3)原料混合：将干菌丝体10g、玉米粉250g、大麦粉350g，卡拉胶100g、食盐40g，米糠100g粉碎至150目，于混合机均匀混合，得到富含硒、锌复合食用菌菌丝体的猪饲料。

实施例3

(1)发酵培养基的制备：发酵培养基的配方具体为：亚硒酸钙4g/L，(NH4)2SO4 4g/L，谷氨酸4g/L，KH2PO4 8g/L，ZnSO4·7H2O 0.5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖10g/L，酵母膏8g/L，MgSO4·7H2O 1g/L，VB6 0.5g/L，Vc 0.5g/L，水1000ml，pH8，121℃高温灭菌；

(2)干菌丝体的制备：将香菇液体菌种和平菇液体菌种按照体积比1:2于发酵培养基中培养，接种量为10％(v/v)，发酵培养温度为32℃，培养时间为16～18h。得到含菌丝体的发酵液；将菌丝体与发酵液于2000rpm分离，收集菌丝体，烘干至含水量低于5％，得到干菌丝体；

所述香菇液体菌种按下述方法制得：将香菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，吐温80 2ml，MgSO4·7H2O 0.6g，MnSO4·4H2O 0.1g，K2HPO4 1.5g水1000ml，pH 6.26.4；115℃高温灭菌15min，备用。

所述平菇液体菌种按下述方法制得：将平菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏8g，葡萄糖20g，乙酸钠3g，吐温80 1ml，水1000ml，pH 7；115℃高温灭菌15min，备用。

(3)原料混合：将干菌丝体20g、玉米粉200g、大麦粉300g、卡拉胶90g、食盐50g，米糠120g粉碎至150目，于混合机均匀混合，得到富含硒、锌复合食用菌菌丝体的猪饲料。

实施例4

(1)发酵培养基的制备：发酵培养基的配方具体为：亚硒酸钙3.5g/L，(NH4)2SO4 5g/L，谷氨酸3g/L，KH2PO4 6g/L，ZnSO4·7H2O 0.8g/L，蛋白胨15g/L，葡萄糖20g/L，酵母膏10g/L，MgSO4·7H2O 1.1g/L，VB6 0.3g/L，Vc 1.0g/L，水1000ml，pH7.5～8，121℃高温灭菌。

(2)干菌丝体的制备：将香菇液体菌种和平菇液体菌种按照体积比1:2于发酵培养基中培养，接种量为8％(v/v)，发酵培养基冷却至20～35℃，再进行发酵培养，发酵培养温度为35℃，培养时间为16～18h。得到含菌丝体的发酵液； 将菌丝体与发酵液于2000rpm分离，收集菌丝体，烘干至含水量低于5％，得到干菌丝体；

所述香菇液体菌种按下述方法制得：将香菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，吐温80 2ml，MgSO4·7H2O 0.6g，MnSO4·4H2O 0.1g，K2HPO4 1.5g水1000ml，pH 6.4；115℃高温灭菌15min，备用。

所述平菇液体菌种按下述方法制得：将平菇菌株活化制成孢子悬液，接于液体培养基中，接种量10％(v/v)，于25℃、转速120r/min摇瓶培养4～6天；

液体培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏8g，葡萄糖20g，乙酸钠3g，吐温80 1ml，水1000ml，pH 7；115℃高温灭菌15min，备用。

(3)原料混合：将干菌丝体30g、玉米粉250g、大麦粉350g，卡拉胶80g、食盐60g，米糠150g粉碎至150目，于混合机均匀混合，得到富含硒、锌复合食用菌菌丝体的猪饲料。

应用例

选择大连某养猪场日龄0～10日仔猪和健康成年猪各200头，分成仔猪组合成年猪组，再将两组分别随机分成4组(2个实验组，2个对照组)，每组进行5次重复，每次重复10头，公母对半。实验组分别采用实施例2和实施例3制得的富含硒、锌复合食用菌菌丝体的猪饲料进行饲喂；对照组1采用玉米粉200g、大麦粉300g、卡拉胶80g、食盐60g，米糠150g粉碎至150目均匀混合所得饲料进行饲喂；对照组2采用市售的某品牌猪饲料进行饲喂。仔猪和成年猪自由采食及饮水，按照常规进行免疫及驱虫，试验期每天观察并记录仔猪和成年猪的发病情况，试验期总计30日，试验期结束分别统计仔猪和成年猪的平均日增重、日采食量、发病率及成活率。

表1复合食用菌菌丝体的猪饲料对仔猪生长性能的影响

将以对照组1的饲料培养得到的普通猪肉与使用本发明饲料得到的试验猪肉进行营养成分的对比，具体详见表2。

表2营养成分对照表

营养指标 对照组猪肉 试验猪肉 蛋白质(g/100g) 18.6 25.4 钙含量(mg/kg) 50.3 188.0 铁含量(mg/kg) 20.1 165.3 硒含量(mg/kg) 0.042 0.430 锌含量(mg/kg) 20.5 60.0 脂肪(g/100g) 5.20 3.60 胆固醇(mg/kg) 1000 800

由上表可知，使用本发明饲料的猪肉，其蛋白质、钙、铁、硒、锌含量均比对照组猪肉高36.6％、273.76％、722.4％、923.8％、192.7％，同时脂肪和胆固醇的含量分别比对照组低44.4％和25％。本发明的饲料为绿色产品，有效降低了料肉比，节省饲料成本，可以替代抗生素在普通饲料中的应用，同时，本发明所得的饲料富含硒、锌及维生素，可以提高猪的免疫力，降低发病率，促进猪的健康生长。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

本文标签： 菌丝体食用菌制备方法猪饲料