一种龙牙百合快速繁殖方法

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本发明涉及一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤：取龙牙百合种球，不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块，诱导生根培养获得龙牙百合幼苗。本发明的有益效果是：本发明的方法再生效率增高，出芽率为100％左右，污染率降低，培养过程中不会出现反复污染的情况，通过调节培养基条件可提高诱导率并缩短再生周期，有效提高龙牙百合的品质和产量。

1.一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：1)取露地种植2～3个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外层鳞片；2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为5％～7％的高锰酸钾溶液中浸泡15～20min后，用清水洗净；3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。 2.如权利要求1所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，所述MS固体培养基为MS+BA1.8～2.2mg/L+NAA0.8～1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。 3.如权利要求2所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，所述芽伸长培养基为MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.8～1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。 4.如权利要求3所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，所述生根培养基为MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.8～1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。 5.如权利要求4所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7暗期。 6.如权利要求5所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7暗期。 7.如权利要求6所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7暗期。

技术领域

本发明涉及生物药材龙牙百合种子繁育扩种方法，该技术直接应用于生 物药材繁育扩种，尤其涉及一种龙牙百合快速繁殖方法。

背景技术

龙牙百合，栽种于江西(万载、永丰中西山)、湖南(隆回、安化)等地， 其中江西万载白水乡尤为知名，龙牙百合在万载是久负盛名的物产，种植历 史据县志记载可追溯至宋朝，其龙牙百合产品是历朝历代的贡品；龙牙百合 是白花百合中的优良品种，也是营养最好的品种。百合(白花百合)鳞茎 球形，横径2-2.4厘米，鳞片披针形，白色，曝晒时呈黄白色或稍带粉红色。 淀粉含量高，营养丰富，味淡不苦，地上茎高约100厘米，叶散生，倒披针 形。花乳白色有香气，能结实产生种子。

龙牙百合鳞片是最为常用的快速繁殖的组培材料。研究表明，龙牙百合 叶片和子房也可以再生形成小苗。以鳞茎为外植体进行再生虽然取材相对较 方便，但由于鳞茎带菌严重，常常导致消毒不彻底，培养过程中反复污染现 象非常严重，增大工作量，而且以鳞片为外植体再生效率并不十分理想。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供，提供一种龙牙百合快速繁殖方法。 本发明的方法再生效率增高，污染率降低，通过调节培养基条件提高了诱导 率，缩短了再生周期，此再生体系适用于多个龙牙百合品种。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种龙牙百合快速繁殖方 法，包括如下步骤：

1)取露地种植2～3个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除 外层鳞片；

2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为5％～7％的高锰酸钾溶液中浸泡 15～20min后，用清水洗净；

3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不 定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；

4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽 伸长培养；

5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培 养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。

本发明的有益效果是：本发明的方法利用龙牙百合的幼嫩小花瓣片为外 植体，直接再生大量不定芽，继而得到再生苗，与使用鳞片作为外植体进行 组织培养相比，本发明的方法再生效率增高，出芽率为100％左右，平均每 个外植体诱导再生的芽数量可达20个左右，污染率降低，培养过程中不会 出现反复污染的情况，通过调节培养基条件可提高诱导率并缩短再生周期。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，所述MS固体培养基为MS+BA1.8～2.2mg/L+NAA0.8～1.2mg/L， pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。

进一步，所述芽伸长培养基为MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.8～1.2mg/L， pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。

进一步，所述生根培养基为MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.8～1.2mg/L， pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。

进一步，步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为：温度25℃，光照： 14光期/7暗期。

进一步，步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为：温度25℃，光照：14 光期/7暗期。

进一步，步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为：温度25℃，光照： 14光期/7暗期。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释 本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例一

一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤：

1)取露地种植2个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外 层鳞片；

2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为5％的高锰酸钾溶液中浸泡15min 后，用清水洗净；

3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不 定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；

4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽 伸长培养；

5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培 养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。

所述MS固体培养基为MS+BA1.8mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖28g/L， 琼脂4g/L。

所述芽伸长培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖28g/L， 琼脂4g/L。

所述生根培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖28g/L，琼 脂4g/L。

步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

实施例二

一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤：

1)取露地种植2.5个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除 外层鳞片；

2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为6％的高锰酸钾溶液中浸泡18min 后，用清水洗净；

3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不 定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；

4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽 伸长培养；

5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培 养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。

所述MS固体培养基为MS+BA2.2mg/L+NAA1.2mg/L，pH5.8，蔗糖32g/L， 琼脂6g/L。

所述芽伸长培养基为MS+BA0.7mg/L+NAA1.2mg/L，pH5.8，蔗糖32g/L， 琼脂6g/L。

所述生根培养基为MS+BA0.7mg/L+NAA1.2mg/L，pH5.8，蔗糖32g/L，琼 脂6g/L。

步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

实施例三

一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤：

1)取露地种植3个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外 层鳞片；

2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为7％的高锰酸钾溶液中浸泡20min 后，用清水洗净；

3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不 定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；

4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽 伸长培养；

5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培 养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。

所述MS固体培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L，pH5.8，蔗糖30g/L， 琼脂5g/L。

所述芽伸长培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L，pH5.8，蔗糖30g/L， 琼脂5g/L。

所述生根培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L，pH5.8，蔗糖30g/L，琼 脂5g/L。

步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为：温度25℃，光照：14光期/7 暗期。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明 的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发 明的保护范围之内。

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