一种功能性复合蛋白粉及其制备方法

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本发明公开了一种功能性复合蛋白粉及其制备方法，以大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白和磷脂为主要原料，将甜叶菊低温加工成甜叶菊提取物，可最大限度地保留甜叶菊的有效成分和生物活性成分，提取率高，风味纯正、色泽天然、无甘草味，与主料科学复配，并添加抗冻多肽、膳食纤维粉、蜂蛹虫酶解物、小麦芽粉，制备一种口感适宜、溶解性好、营养全面、生物活性强、适宜人群广泛的功能性复合蛋白粉。制备方法采用非热加工技术，工作效率高，能源消耗少，对环境友好，无污染，减少了食品添加剂和化学助剂的引入，有效提高了食品安全性，提高了产品质量和降低了生产成本，实现了低碳生产目标，可规模化、产业化发展。

1.一种功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白50-90份，浓缩乳清蛋白60-80份，膳食纤维粉45-65份，小麦芽粉20-40份，磷脂10-30份，抗冻多肽10-20份，蜂蛹虫酶解物5-15份，甜叶菊1-3份。 2.如权利要求1所述的功能性复合蛋白粉，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白60-80份，浓缩乳清蛋白65-75份，膳食纤维粉50-60份，小麦芽粉25-35份，磷脂15-25份，抗冻多肽13-17份，蜂蛹虫酶解物8-12份，甜叶菊1.5-2.5份。 3.如权利要求1所述的功能性复合蛋白粉，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白70份，浓缩乳清蛋白70份，膳食纤维粉55份，小麦芽粉30份，磷脂20份，抗冻多肽15份，蜂蛹虫酶解物10份，甜叶菊2份。 4.如权利要求1-3任一所述的功能性复合蛋白粉，其特征在于，所述膳食纤维粉的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维按质量比4-6:2-4:1-3:1-2均匀混合，超微粉碎至粒径3-6μm，调整粉碎物水分含量为17-19％，于螺杆转速160-180r/min、温度185-200℃条件挤压膨化，加入膨化物质量2-4倍的水，室温200-400W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥即得膳食纤维粉；所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比2-4:1-3:1-3:0.5-1.5:0.2-1均匀混合。 5.如权利要求1-3任一所述的功能性复合蛋白粉，其特征在于，所述小麦芽粉的制备方法，包括如下步骤：将小麦放在装有0.04-0.06％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于功率200-400W、频率20-30KHz室温超声清洗3-5min，取出、沥干，于频率2450MHz、功率3000W、温度38-42℃、料层厚度2-4cm微波干燥6-8s,然后置温度为33-36℃、pH值为6-8的浸泡液中浸泡4-6h，浸泡液含有质量百分比浓度为0.3-0.5％的复合酶，每隔15-20min通风一次，通风压力0.13-0.15MPa，同时于电场强度10-15kV/cm，脉冲时间100-300μs,脉冲频率60-80Hz条件进行高压脉冲电场处理，直至小麦水分含量为40-45％；浸泡后的小麦沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持20-24℃，暗发芽时间为20-24h，经发芽后的小麦干燥至水分含量为5-8％，低温粉碎，过80-100目筛即得小麦芽粉；所述复合酶为纤维素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按质量比2-4:1-3:1-3均匀混合。 6.如权利要求1-3任一所述的功能性复合蛋白粉，其特征在于，所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝12-29:3-9；所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙地柏、沙冬青的种子按质量比9-17:2-4:1-2均匀混合，装盘，首先于电场强度5-7kV/cm高压静电处理5-7min；接着在浓度为10-30mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2-4h，同时在电场强度10-20kV/cm，脉冲时间150-250μs,脉冲频率150-250Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置18-24h,然后依次在1-3℃冷藏2-4d,-3--5℃冷冻1-3d、-15--18℃冷冻10-15h,立即放在室外于光照强度0.5-5万Lx自然光照5-7h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径0.5-1.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5；最后加入混合料液质量1-2％的混合酶，首先于35-50℃酶解10-30min,然后于50-60℃酶解20-40min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为15-25％即得植物提取物；所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶按质量比8-10:5-7:2-4:1-3:1-2均匀混合。 7.如权利要求1-3任一所述的功能性复合蛋白粉，其特征在于，所述蜂蛹虫酶解物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜蜂王幼虫与雄蜂蛹按质量比2-5:1-3均匀混合，加入混合物质量1-2倍的质量百分比为4-7％的丝胶肽溶液和0.1-0.3倍的离子溶液，搅拌均匀，于-18--22℃冷冻12-18min，破碎，破碎率为98-100％，破碎物粒径200-300μm，用乳酸调节破碎物pH值为5-7，升温至40-50℃，向其中加入破碎物质量0.3-0.5％的复配酶，混合均匀，于真空度-0.07--0.09MPa脱气脱腥10-15min，继续酶解10-15min得到酶解液；将酶解液置真空离心机中5000-7000r/min真空离心8-10min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、水解液和残渣，将得到的乳状液控制温度为45-55℃，添加乳状液质量0.2-0.4％的生物破乳剂破乳20-40min,破乳后于4000-6000r/min真空离心2次，间隔时间1-3h，每次离心10-15min，合并三次离心得到的水解液，取其质量0.5-0.7％的蛋清，放入搅拌机中于转速800-1000r/min搅拌10-12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入合并得到的水解液中，常压煮沸2-4min,降至室温，于5000-7000r/min真空离心8-10min，收集水解液，依次经硅藻土过滤、超滤、冻干即得蜂蛹虫酶解物；所述离子溶液为含有钠离子15-20mg/L、锌离子10-15mg/L、钾离子8-12mg/L、钙离子6-10mg/L和镁离子5-8mg/L的水溶液；所述复配酶质量组成为：风味蛋白酶:酸性蛋白酶:脂肪酶＝1-3:1-2:0.1-0.3；所述真空离心条件为温度5-8℃、真空度-0.02--0.04MPa。 8.如权利要求7所述的功能性复合蛋白粉，其特征在于，所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类:胞壁结合类＝3-5:1-3:1-2；所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝6-8:3-5。 9.如权利要求1-8任一所述功能性复合蛋白粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200-400W、20-40KHz清洗3-5min，沥干，置微波干燥中于功率3-5kW、料层厚度2-4cm、80-100℃、干燥2-4min，然后浸泡在质量百分比为4-7％的丝胶肽溶液中10-15min,取出，于-18--22℃冷冻15-25min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.3-0.5mm,接着加入粉碎物质量8-12倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取8-12min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.2-0.6％的降解酶，于40-50℃酶解30-50min，取酶解液质量2-4％的蛋清，放入搅拌机中于转速800-1000r/min搅拌10-12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸1-3min,迅速降至室温，80-100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至8-12％得甜叶菊提取物；所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比1-3:1-2:1-2均匀混合；2)混料：将抗冻多肽质量的40-60％和膳食纤维粉质量的4-6％依次加入甜叶菊提取物中，均匀混合，在功率300-500W,频率35-45KHz条件下进行超声溶解10-15min,得混合液；3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-40～-50℃，并在-40～-50℃下预冻2～3h；然后将冻干仓内抽真空至15～20Pa后，在8-10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15～-18℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在5-7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。 10.如权利要求9所述功能性复合蛋白粉的制备方法，其特征在于，所述功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白70份，浓缩乳清蛋白70份，膳食纤维粉55份，小麦芽粉30份，磷脂20份，抗冻多肽15份，蜂蛹虫酶解物10份，甜叶菊2份；所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝21:6；制备方法，包括如下步骤：1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于300W、30KHz清洗4min，沥干，置微波干燥中于功率4kW、料层厚度3cm、90℃、干燥3min，然后浸泡在质量百分比为6％的丝胶肽溶液中12min,取出，于-20℃冷冻20min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径0.4mm,接着加入粉碎物质量10倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min；然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取10min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.4％的降解酶，于45℃酶解40min，取酶解液质量3％的蛋清，放入搅拌机中于转速900r/min搅拌11min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸2min,迅速降至室温，90目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至10％得甜叶菊提取物；所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比2:1.5:1.5均匀混合；2)混料：将抗冻多肽质量的50％和膳食纤维粉质量的5％依次加入甜叶菊提取物中，均匀混合，在功率400W,频率40KHz条件下进行超声溶解12min,得混合液；3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-45℃，并在-45℃下预冻2.5h；然后将冻干仓内抽真空至18Pa后，在9h内逐步升温并控制混合液最终温度在-16℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在6h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。

技术领域

本发明涉及蛋白粉，特别涉及一种功能性复合蛋白粉及其制备方法。

背景技术

蛋白质是人体的主要构成物质，又是人体生命活动的主要物质。蛋白质加上核酸，是生命存在的主要形式。蛋白质在古拉丁语的原意是“首要”的意思，它虽是营养物质的一份子，但却是处于各种营养物质一个中心的地位，其作用主要是：1、用于制造肌肉、血液、皮肤和各种身体器官。2、帮助身体制造新组织以替代坏掉的组织。3、向细胞输送各种营养。4、调节体内水分的平衡。5、为免疫系统制造对抗细菌和感染的抗体。6、帮助伤口血液凝结及愈合。7、在体内制造酶，有助将食物转化为能量。人体缺乏蛋白质是可以致命的，人体中的蛋白质约占体重的16％，一个60kg体重的人，体内有10～11kg的蛋白质，人体如果丢失体内蛋白质的20％以上，生命活动就会被迫停止运行。常见蛋白质的缺乏症状为代谢率下降，生命变得脆弱而易病，远期效果在器官上的损害是肯定的，蛋白质的缺乏，往往又与能量的缺乏共同存在，常见的有儿童生长发育迟缓，体重下降。中老年人易产生淡漠、易激怒，情绪不稳定，贫血以及干瘦或水肿，并因为免疫力低下易感染而继发疾病。

乳清蛋白能对抗各种免疫挑战，能促进体液免疫和细胞免疫。此外亦发现乳清蛋白可对抗微生物感染，如沙门氏菌、链球菌性肺炎等。大豆蛋白质约占大豆含量的40％，是谷类食物的4～5倍。大豆蛋白质的氨基酸组成与牛奶蛋白质相近，除蛋氨酸略低外，其余必需氨基酸含量均较丰富，是植物性完全蛋白质，在营养价值上可与动物蛋白等同。大豆蛋白对健康所起的积极作用主要有：大豆蛋白有助于降低血浆胆固醇水平，能阻止尿钙损失，有助促进骨质健康。另外大豆蛋白的摄入有促进肾功能的效果，大豆蛋白可以作为肾病患者相对安全的蛋白质来源。

磷脂是含有磷脂根的类脂化合物，是生命基础物质。而细胞膜就由4 0％左右蛋白质和50％左右的脂质(磷脂为主)构成。它是由卵磷脂，肌醇磷脂，脑磷脂等组成。这些磷脂分别对人体的各部位和各器官起着相应的功能。人体所有细胞中都含有磷脂，它是维持生命活动的基础物质。磷脂对活化细胞，维持新陈代谢，基础代谢及荷尔蒙的均衡分泌，增强人体的免疫力和再生力，都能发挥重大的作用。概括来讲磷脂的基本功用是：增强脑力，安定神经，平衡内分泌，提高免疫力和再生力，解毒利尿，清洁血液，健美肌肤，保持年轻，延缓衰老。

目前，以大豆分离蛋白、乳清蛋白、磷脂为原料制备复合蛋白粉的较多,有的主要以补充人体营养为目的：中国专利CN 104770743 A公开了一种复合蛋白粉及其制备方法。复合蛋白 粉含有大豆蛋白粉、乳清蛋白粉、青稞蛋白粉、马铃薯蛋白粉、甘薯蛋白粉、胶原蛋白粉、豌豆蛋白粉、核桃粉、蛋清粉、蛋黄粉、大豆磷脂、油菜花粉、甜味剂、香精。其制备方法是将原料烘烤、冷却、混合、包装，即可得成品。该发明所选取的原料配比符合现代养生原理，配方科学合理，具有良好的补充人体所需营养的作用，且口感良好、风味独特。中国专利CN 105146043 A公开了一种玛咖蛋白粉，由主料和辅料混合制备而成，所述主料为玛咖粉和大豆蛋白粉；所述辅料，包括卵磷脂、乳清蛋白粉、结晶果糖、香兰素、植脂末、低聚果糖、微量元素、复合维生素、二氧化硅和魔芋胶；其配料质量比为：玛咖粉2.2-3.8份、大豆蛋白粉55-80份、卵磷脂1.5-2.5份、乳清蛋白粉4.9-8.5份、结晶果糖7.3-9.2份、香兰素0.0015-0.0035份、植脂末4.8-8.2份、低聚果糖5.1-6.7份、微量元素0.9-1.5份、复合维生素0.08-0.22份、二氧化硅0.07-0.2份和魔芋胶0.08-0.23份，将配料粉碎后，过100-150目筛，混合均匀，即得。该发明有效补充缺少的营养物质，全面调节营养平衡，提高免疫力，强健身体。中国专利CN 103005464 B公开了一种乳清蛋白组合物、方法及用途。该发明提供了多种乳清蛋白组合物，其作为营养配方适合用作即用液体组合物，其贮存稳定并且含有高水平的完整乳清蛋白含量。

有的以预防和治疗疾病为目的：中国专利CN 103584089 A公开了一种多营养复合蛋白质粉的加工方法，是由下述重量份的原料制成：类人胶原蛋白15、牛初乳15、大豆蛋白350、乳清蛋白550、灵芝5、金银花5、玄参5、麦冬3、银杏叶2、斑竹根3、丹参3、金荞麦2、黄开口3、洛神花汁30；该发明提供了一种多营养复合蛋白质粉的加工方法，其加工步骤简单，原料来源广，安全健康；采用该发明方法生产的蛋白质粉，营养丰富,食用方便,吸收、利用率高,能减少肠胃负担,并且在补充蛋白质的同时可以避免过量脂肪和胆固醇的摄入,能有效地减少心血管疾病的发病风险。中国专利CN 104839736 A公开了一种可以预防老年痴呆症的蛋白粉，其由下列重量的原料组成：大豆蛋白粉80-90，乳清蛋白粉20-30、野菊花冻干粉10-12、核桃仁10-12、茯苓12-15、黑芝麻6-8、荸荠12-15、莲子10-12、大枣12-15、山药10-12、金针菇10-12、猴头菇15-20、银耳12-15，远志10-12，昆布10-12，何首乌10-12、绞股蓝12-16、人参叶2-15，银杏叶12-15、石菖蒲10-12，营养添加剂3-5。该发明的蛋白粉，营养丰富，长期食用可以起到安神健脑、补肝益肾，改善脑细胞的活力，得到健脑，预防发生老年性痴呆症的功效。中国专利公开了CN 103768585 B一种鹿胶原蛋白营养组合物，由鹿胶原蛋白、氨基葡萄糖、透明质酸、大豆异黄酮和茶多酚组成。所述组合物中含有70％～95％(重量百分比)的鹿胶原蛋白、1％～10％(重量百分比)的氨基葡萄糖、1％～10％(重量百分比)的透明质酸、0.1％～5％(重量百分比)的大豆异黄酮和0.1％～6％(重量百分比)的茶多酚。所述鹿胶原蛋白由鹿筋胶原蛋白、鹿骨胶原蛋白和鹿皮胶原蛋白组成，鹿筋 胶原蛋白、鹿骨胶原蛋白和鹿皮胶原蛋白的重量比为1:1:1。所述鹿胶原蛋白的分子量分布在1500道尔顿以下。该发明以鹿胶原蛋白为主要成分，辅以氨基葡萄糖、透明质酸、大豆异黄酮及抗氧化作用的茶多酚形成了具有增强骨密度、能够显著改善骨质疏松的营养组合物。

还有主要解决溶解性问题的：中国专利CN 103271166 A公开了一种大豆乳清复合粉及其配制方法。该大豆乳清复合粉是以非转基因大豆蛋白粉和乳清蛋白为主要原料，添加大豆卵磷脂、大豆异黄酮、大豆低聚糖及其它微量元素，营养更丰富，更全面，更均衡。含多种天然活性成分，为高蛋白营养食品。具有大豆蛋白特有的香味，口感爽滑，口味纯正，浓郁，即冲即溶，补充营养快速全面。在温开水中稍微搅拌能够快速溶解，具有固有的香味和气味，并且长时间不分层。中国专利CN 102630947 B公开了一种低分子量营养蛋白质粉的生产方法，该方法包括以下步骤：以大豆蛋白粉与乳清蛋白粉为原料，加入70～90℃水搅拌成均匀的混悬液，在不低于60℃条件下趁热通过滤膜过滤：先选用5000道尔顿的滤膜，滤液再通过500道尔顿的滤膜；将得到的滤液喷雾干燥，加入喷雾干燥粉体重0.5～1.5％的卵磷脂混合均匀。该发明工艺制备得到的蛋白质粉分子量小、氨基酸组成科学合理，易吸收；外形洁白，美观，无豆腥、奶腥味；易溶于水，在冷水中也可较快溶解，易于分散，特别适用于蛋白质缺乏人群，体弱多病以及肿瘤患者。

上述公开的专利无论是单一蛋白粉还是复合蛋白粉、无论是动物蛋白粉还是植物蛋白粉主要集中解决了蛋白质粉的营养性、功能性(溶解性、稳定性、泡沫性、乳化性、凝胶性等)和预防疾病等方面，并且均或多或少存在以下缺陷：1)含有大量的过量饱和脂肪、胆固醇、高热量；2)在加工工艺中添加了大量的食品添加剂如色素、甜味剂、防腐剂等；3)溶解性、稳定性差，冲调不均匀，易出现结团、分层现象；4)氨基酸组成不够全面，各营养成分组成不够均衡；5)消费群体涉及中老年人和妇女较少，有局限性；对蛋白粉的生物活性研究的较少，蛋白质粉的生物活性、效价是其营养性、功能性等多方面性质的综合体现，在加工和贮存过程受外界环境(温度、湿度、光照、氧气)的影响很大，尤其在活性微生物菌剂、酶制剂等技术领域显现更为突出。

长期以来，在蛋白质粉生物活性方面主要集中研究了高温对蛋白质生物活性的影响，却忽视了低温冷冻的影响。抗冻蛋白(Antifreeze Protein,AFP)，又称热滞蛋白(Thermal Hysteresis Protein,THP)，冰结合蛋白(Ice Binding Proteins)或冰晶组织蛋白(Ice Structuring Proteins)。抗冻蛋白能通过与特定的冰晶表面结合，非依数性地降低溶液的冰点或者抑制冰晶生长，具有低温保护功能。抗冻蛋白可用于人体或动物器官的超低温保存，改善其冷冻质量；可提高特定微生物的抗冻能力，减小食品冻藏时冰晶的形成和重结晶对食品结构的破坏，改善食品品质。抗冻蛋白可作为一种高级防冻剂应用，在医学、化妆品、生 物和食品领域均有广泛的应用价值。

在蛋白质粉的加工、运输和储藏过程科学复配抗冻蛋白(或相关物质)，不仅可提高蛋白质粉的生物活性、营养性、功能性，而且在同样保质期内可适当提高蛋白粉的水分含量，降低生产成本。现有技术中解决复合蛋白粉或组合物的抗冻性的相关专利文献或技术文献较少，几乎没有。

发明内容

本发明所解决的技术问题是克服现有复合蛋白组合物的缺陷，以大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白和磷脂为主要原料，将甜叶菊低温加工成甜叶菊提取物，与其科学复配，并添加抗冻多肽、膳食纤维粉、蜂蛹虫酶解物、小麦芽粉，制备一种口感适宜、溶解性好、营养全面、生物活性强、适宜人群广泛的功能性复合蛋白粉。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白50-90份，浓缩乳清蛋白60-80份，膳食纤维粉45-65份，小麦芽粉20-40份，磷脂10-30份，抗冻多肽10-20份，蜂蛹虫酶解物5-15份，甜叶菊1-3份；

优选地，所述功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白60-80份，浓缩乳清蛋白65-75份，膳食纤维粉50-60份，小麦芽粉25-35份，磷脂15-25份，抗冻多肽13-17份，蜂蛹虫酶解物8-12份，甜叶菊1.5-2.5份；

更优选地，所述功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白70份，浓缩乳清蛋白70份，膳食纤维粉55份，小麦芽粉30份，磷脂20份，抗冻多肽15份，蜂蛹虫酶解物10份，甜叶菊2份；

进一步地，所述膳食纤维粉是将膳食纤维经物理、化学或生物的方法处理而得到的可溶性纤维素含量高、生物活性强、对人体益生菌群有重要的、积极作用的纤维素，与普通膳食纤维相比，其功能性、生物活性更强大；

优选地，所述膳食纤维粉是由菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维中的一种或多种经超微粉碎、挤压膨化和生物酶酶解而得到的；

更优选地，所述膳食纤维粉的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维按质量比4-6:2-4:1-3:1-2均匀混合，超微粉碎至粒径3-6μm，调整粉碎物水分含量为17-19％，于螺杆转速160-180r/min、温度185-200℃条件挤压膨化，加入膨化物质量2-4倍的水，室温200-400W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；用乳酸调节 pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥即得膳食纤维粉；

所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比2-4:1-3:1-3:0.5-1.5:0.2-1均匀混合。

进一步地，所述小麦芽粉是以小麦为主要原料，依次经超声清洗、微波瞬时处理、超声辅助生物酶解浸泡、发芽、干燥、低温粉碎等工艺而制备的；

优选地，所述小麦芽粉的制备方法，包括如下步骤：将小麦放在装有0.04-0.06％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于功率200-400W、频率20-30KHz室温超声清洗3-5min，取出、沥干，于频率2450MHz、功率3000W、温度38-42℃、料层厚度2-4cm微波干燥6-8s,然后置温度为33-36℃、pH值为6-8的浸泡液中浸泡4-6h，浸泡液含有质量百分比浓度为0.3-0.5％的复合酶，每隔15-20min通风一次，通风压力0.13-0.15MPa，同时于电场强度10-15kV/cm，脉冲时间100-300μs,脉冲频率60-80Hz条件进行高压脉冲电场处理，直至小麦水分含量为40-45％；浸泡后的小麦沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持20-24℃，暗发芽时间为20-24h，经发芽后的小麦干燥至水分含量为5-8％，低温粉碎，过80-100目筛即得小麦芽粉；

所述复合酶为纤维素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按质量比2-4:1-3:1-3均匀混合。

进一步地，所述抗冻多肽是以含有丰富抗冻基质的天然植物种子为原料制备的植物提取物与丝胶肽科学复配而成，不仅可显著提高功能性复合蛋白粉抗冻性，进而大大提高其生物活性、营养性、功能性，而且在同样保质期内可适当提高功能性复合蛋白粉的水分含量，降低生产成本；同时又增加了功能性复合蛋白粉的溶解性和稳定性，产生了意想不到的有益效果，特别适合作为功能性复合蛋白粉的抗冻保护剂；

优选地，所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝12-29:3-9；

优选地，所述植物提取物是以冬黑麦、沙地柏、沙冬青的种子中的一种或几种为原料，经高压静电、高压脉冲电场辅助水杨酸浸泡、冷藏冷冻处理后再经混合酶分段酶解而制得；

更优选地，所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙地柏、沙冬青的种子按质量比9-17:2-4:1-2均匀混合，装盘，首先于电场强度5-7kV/cm高压静电处理5-7min；接着在浓度为10-30mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2-4h，同时在电场强度10-20kV/cm，脉冲时间150-250μs,脉冲频率150-250Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置18-24h,然后依次在1-3℃冷藏2-4d,-3--5℃冷冻1-3d、-15--18℃冷冻10-15h,立即放在室外于光照强度0.5-5万Lx自然光照5-7h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径0.5-1.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5；最后加入混合 料液质量1-2％的混合酶，首先于35-50℃酶解10-30min,然后于50-60℃酶解20-40min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为15-25％即得植物提取物；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶按质量比8-10:5-7:2-4:1-3:1-2均匀混合。

进一步地，所述蜂蛹虫酶解物以2-3日龄的蜂王幼虫和11-12日龄的雄蜂蛹为原料，经抗冻保护、冷冻破碎、真空脱气脱腥、复配酶生物酶解、生物破乳和离心分离而得到的；

优选地，所述蜂蛹虫酶解物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜蜂王幼虫与雄蜂蛹按质量比2-5:1-3均匀混合，加入混合物质量1-2倍的质量百分比为4-7％的丝胶肽溶液和0.1-0.3倍的离子溶液，搅拌均匀，于-18--22℃冷冻12-18min，破碎，破碎率为98-100％，破碎物粒径200-300μm，用乳酸调节破碎物pH值为5-7，升温至40-50℃，向其中加入破碎物质量0.3-0.5％的复配酶，混合均匀，于真空度-0.07--0.09MPa脱气脱腥10-15min，继续酶解10-15min得到酶解液；将酶解液置真空离心机中5000-7000r/min真空离心8-10min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、水解液和残渣，将得到的乳状液控制温度为45-55℃，添加乳状液质量0.2-0.4％的生物破乳剂破乳20-40min,破乳后于4000-6000r/min真空离心2次，间隔时间1-3h，每次离心10-15min，合并三次离心得到的水解液，取其质量0.5-0.7％的蛋清，放入搅拌机中于转速800-1000r/min搅拌10-12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入合并得到的水解液中，常压煮沸2-4min,降至室温，于5000-7000r/min真空离心8-10min，收集水解液，依次经硅藻土过滤、超滤、冻干即得蜂蛹虫酶解物；

进一步地，所述离子溶液为含有钠离子15-20mg/L、锌离子10-15mg/L、钾离子8-12mg/L、钙离子6-10mg/L和镁离子5-8mg/L的水溶液；

进一步地，所述复配酶质量组成为：风味蛋白酶:酸性蛋白酶:脂肪酶＝1-3:1-2:0.1-0.3；

进一步地，所述真空离心条件为温度5-8℃、真空度-0.02--0.04MPa；

进一步地，所述生物破乳剂为糖脂类、脂肽类、胞壁结合类生物破乳剂中的一种或几种组合；

优选地，所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类:胞壁结合类＝3-5:1-3:1-2；

优选地，所述糖脂类生物破乳剂为鼠李糖脂、烷基糖苷中的一种或两种组合；

更优选地，所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝6-8:3-5。

本发明还提供了上述功能性复合蛋白粉的制备方法，包括如下步骤：

1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200-400W、20-40KHz清洗3-5min，沥干，置微波干燥中于功率3-5kW、料层厚度2-4cm、80-100℃、干燥2-4min，然后浸泡在质量百分比 为4-7％的丝胶肽溶液中10-15min,取出，于-18--22℃冷冻15-25min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.3-0.5mm,接着加入粉碎物质量8-12倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取8-12min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.2-0.6％的降解酶，于40-50℃酶解30-50min，取酶解液质量2-4％的蛋清，放入搅拌机中于转速800-1000r/min搅拌10-12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸1-3min,迅速降至室温，80-100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至8-12％得甜叶菊提取物；

所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比1-3:1-2:1-2均匀混合；

2)混料：将抗冻多肽质量的40-60％和膳食纤维粉质量的4-6％依次加入甜叶菊提取物中，均匀混合，在功率300-500W,频率35-45KHz条件下进行超声溶解10-15min,得混合液；

3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-40～-50℃，并在-40～-50℃下预冻2～3h；然后将冻干仓内抽真空至15～20Pa后，在8-10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15～-18℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在5-7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。

有益效果：

本发明以大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白和磷脂为原料，首先将甜叶菊采用超声清洗进行杀虫灭卵、杀灭微生物、去除农药残留和重金属离子等，大大提高了成品的食品安全性；采用微波干燥在使得甜叶菊短时、低温膨化干燥的同时主要是灭酶，防止提取物褐变；在含有丝胶肽的水溶液中浸泡复水，可最大限度地减少经冷冻而造成的甜叶菊活性物质及冷敏性成分的损失，提高了甜叶菊生物活性成分的提取率，同时将抗冻多肽、膳食纤维粉与甜叶菊提取物科学复配，为后续冻干工艺及成品贮藏提供了良好的冷冻保护剂，提高了抗冻效果，防止蛋白质冷冻变性，提高其生物活性和效价；全程采用低温提取工艺，将超声清洗、微波灭酶和膨化、高压脉冲电场提取、超声辅助微波提取、生物酶解有机结合，得到的提取物最大限度地保留了甜叶菊的天然色泽、风味和口感，同时使得提取物含有的生物活性物质和营养保健物质含量最大化，原料提取率和利用率最高，降低了提取成本；采用蛋清制备的蛋清泡沫对酶解液短时凝絮，进一步去除了甜叶菊苷的甘草味，提高了成品的溶解性和稳定性；将部分膳食纤维粉、抗冻多肽加入甜叶菊提取物不仅提高了抗冻效果还可提高混料的固形物含量，降低水分含量，缩短了冻干时间，提高了冻干效率，降低了冷冻损失，提高了冻干粉的稳定 性，经超声溶解，进一步增强了混料的均一性、稳定性和溶解性，进而提高了成品的均一性、稳定性和溶解性；采用本发明制备的功能性膳食纤维粉代替现有的抗结剂，显著提高了成品的崩解速度，提高了成品的溶解性和溶解后的感官质量，同时大大延长了成品的保质期；最终制得一种口感适宜、溶解性好、营养全面、生物活性强、适宜人群广泛的功能性复合蛋白粉。具体试验效果见实施例7-10，具体技术原理如下：

1.本发明制备的抗冻多肽是以含有丰富抗冻基质的天然植物种子为原料制备的植物提取物与丝胶肽科学学复配而成，不含任何化学物质和食品添加剂，天然抗冻基质全面、丰富，可溶性抗冻蛋白及抗冻多肽含量高，大大提高了功能性复合蛋白粉的食品安全性，不仅可显著提高功能性复合蛋白粉抗冻性，进而大大提高其生物活性、营养性、功能性，而且在同样保质期内可适当提高蛋白粉的水分含量，降低生产成本；同时又增加了功能性复合蛋白粉的溶解性和稳定性，产生了意想不到的有益效果，特别适合作为功能性复合蛋白粉的抗冻保护剂。其中的植物提取物将含有丰富抗冻基质的天然植物种子原料科学复配，将高压静电处理、高压脉冲电场辅助水杨酸诱导、低温分段胁迫处理和自然光照有机结合，使得本身含有抗冻基质的活性种子在外界环境的胁迫和诱导下，抗冻基质成分得到了最全面、最丰富的合成和积累，经生物酶解后可最大化溶出，同时可使抗冻肽含量增加，提高了植物提取物的溶解性和稳定性，进而消除了因抗冻蛋白造成的成品溶解性差的问题，与膳食纤维粉、小麦芽粉、蜂蛹虫酶解物、磷脂、甜叶菊提取物科学复配，效果更佳。

2.本发明制备的膳食纤维粉将超微粉碎、挤压膨化、超声提取、高压脉冲电场提取和生物酶解科学结合，所得膳食纤维粉持水性、膨胀性、增稠性更强，比单一方法制备的改性膳食纤维提高20-40％，且不受酸、碱、盐的影响，可溶性纤维素含量高，比单一方法制备的改性膳食纤维提高10-30％，更容易被乳酸菌利用，提高乳酸菌在人体肠道的生长及繁殖能力，增加益生菌菌群的种类和数量，降低人体肠道pH值，改善人体肠道微生态环境；吸附能力强，经改性后，纤维素的比表面积增大，网格结构丰富，吸附力增强，螯合、吸附胆固醇和胆汁酸类的有机分子能力更强、抑制人体对他们的吸收；离子交换能力增强，对金属元素，特别是重金属元素吸附效果更强，有效防止了人体重金属中毒；调节和维持肠道菌群的定植时间，增强肠道的消化和吸收能力，提高机体免疫力；有效促进胃肠蠕动，减缓并消除胃胀、腹胀等不良反应；强大的包埋作用可防止环境(氧气、温度、光照、水分活度等)因素对功能性复合蛋白粉的影响，进一步稳定了功能性复合蛋白粉的生物活性，延长了产品的保质期。

3.本发明小麦芽粉的制备方法对浸泡过程的小麦进行超声清洗、微波瞬时处理和高压脉冲电场处理有效防止了浸泡液污染杂菌，避免了产生臭味渗透到小麦芽粉产品中，同时，可有效增强谷物种皮细胞壁和细胞膜的相对透性、提高全谷物种子的吸水率，促进种子提前萌 发，提高超氧阴离子自由基的产生速率及三磷酸腺苷(ATP)含量，促进发芽前期小麦种子多种生物酶的激活和释放、胚乳溶解及功能性营养成分、生物活性成分、抗氧化成分的合成，促进了种子的呼吸代谢作用，加快了营养及功能性物质、生物活性成分、抗氧化成分的富集进程，缩短了富集时间，提高了营养及功能性物质、生物活性成分、抗氧化成分的含量，与生物酶解有机结合，可进一步降解种皮纤维素及半纤维素结构，增加种皮通透性，激活各种生物活性物质(内源酶等)活力最强，富集量更大，可溶性纤维素含量随之增大，为小麦芽粉中的植物乳杆菌提供了营养因子，效果更佳显著；将超声、微波、高压脉冲电场技术和生物酶解有机结合，缩短了浸泡时间，提高了发芽率和发芽均一度；可最大限度保持小麦芽粉热敏性物质含量，尤其是抗氧化物质(谷胱甘肽、六磷酸肌醇、维生素C、多酚等)，最大限度地保证小麦芽粉的天然色泽、口感和风味，同时还可起到杀菌作用；特别是经微波瞬时适度杀胚后，在不影响小麦芽种子的生物活性的情况下，随着水分的吸收，小麦芽胚被抑制但不影响各项酶及生物活性物质的增长和胚乳的溶解，芽生长很短，呼吸作用弱，发芽损失低，提高了小麦芽粉的产量和质量，显著提高了小麦芽粉产品中功能性、营养性、生物活性物质的含量，提高了小麦芽粉的保健功能(提高人体免疫力、去除人体内氧自由基、降血脂、延缓衰老)、营养价值和食品安全性。制备的小麦芽发芽率达97％以上，芽长0.2-0.5mm,长度均一，发芽损失仅为1.5-2.1％，比现有发芽工艺损失降低4.8-7.1％，功能性物质含量高，其中γ-氨基丁酸含量为303.8-315.6mg/100g，谷胱甘肽16.1-18.3mg/100g，六磷酸肌醇(IP6)460.8-484.4mg/100g，膳食纤维3.7-4.2mg/100g。

4.本发明制备的蜂蛹虫酶解物以2-3日龄的蜂王幼虫和11-12日龄的雄蜂蛹为原料，经抗冻保护、冷冻破碎、真空脱气脱腥、复配酶生物酶解、生物破乳和真空离心分离等低温加工技术而得到的，有效提高了蜂王幼虫和雄蜂蛹的利用率，降低了营养及保健物质的损失，最大限度地保留了原料的生物活性成分和营养成物质含量。在含有丝胶肽的水溶液中浸泡，可最大限度地减少经冷冻而造成的蛹虫活性物质的损失，提高了蛹虫有效成分的提取率，同时也为后续的冻干工艺提供了天然抗冻保护剂；将真空脱气与复配酶生物酶解有机结合，不仅降低了酶解液的溶解氧含量，有效防止生物活性成分氧化变质，而且除去了酶解液中蜂王幼虫和雄蜂蛹的虫腥味，提升了复合蛋白组合物的口感，增加了食欲，离子溶液与蜂王蛹虫、雄蜂蛹和复配酶的科学复配，使得复配酶活力发挥最大，催化能力更加彻底，进而使得原料中的蛋白质和脂肪充分降解，提高了蛋白组合物的稳定性和澄明度；将生物破乳剂破乳和真空离心有机结合，可使酶解液中的游离脂肪和水解液充分分离，得到营养和生物活性物质含量丰富、澄清透明的水解液，再加上蛋清泡沫加入和煮沸灭酶，蜂王幼虫和雄蜂蛹酶解物更加稳定、透明，进一步增强了功能性复合蛋白粉的溶解性、泡沫型、稳定性；同时含有大量 的蜂王幼虫多肽和雄蜂蛹多肽，为功能性复合蛋白粉增添了更多的功能性生物活性物质，进一步增强了功能性复合蛋白粉的功能性和营养性。

5.本发明功能性复合蛋白粉的制备方法采用非热加工技术，工作效率高，能源消耗少，对环境友好，无污染，减少了食品添加剂和化学助剂的引入，有效提高了食品安全性，提高了产品质量和降低了生产成本，实现了低碳生产目标，可规模化、产业化发展。

需要说明的是该功能性复合蛋白粉的食用效果是各组分相互协同、相互作用的结果，并非简单的原料功能的叠加，各原料组分的科学复配和提取，产生的效果远远超过各单一组份功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。

具体实施方式

下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

实施例1原料制备

1.膳食纤维粉的制备：

所述膳食纤维粉的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维按质量比5:3:2:1.5均匀混合，超微粉碎至粒径5μm，调整粉碎物水分含量为18％，于螺杆转速170r/min、温度192℃条件挤压膨化，加入膨化物质量3倍的水，室温300W、40KHz条件超声提取12min,然后在电场强度30kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min；用乳酸调节pH值为5.5，加入混合物质量0.2％的生物酶，于50℃酶解35min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥即得膳食纤维粉；

所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比3:2:2:1:0.6均匀混合。

2.小麦芽粉的制备：

所述小麦芽粉的制备方法，包括如下步骤：将小麦放在装有0.05％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于功率300W、频率25KHz室温超声清洗4min，取出、沥干，于频率2450MHz、功率3000W、温度40℃、料层厚度3cm微波干燥7s,然后置温度为35℃、pH值为7的浸泡液中浸泡5h，浸泡液含有质量百分比浓度为0.4％的复合酶，每隔18min通风一次，通风压力0.14MPa，同时于电场强度12kV/cm，脉冲时间200μs,脉冲频率70Hz条件进行高压脉冲电场处理，直至 小麦水分含量为42％；浸泡后的小麦沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持22℃，暗发芽时间为22h，经发芽后的小麦干燥至水分含量为6％，低温粉碎，过90目筛即得小麦芽粉；

所述复合酶为纤维素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按质量比3:2:2均匀混合。

3.植物提取物的制备：

所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙地柏、沙冬青的种子按质量比13:3:1.5均匀混合，装盘，首先于电场强度6kV/cm高压静电处理6min；接着在浓度为20mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡3h，同时在电场强度15kV/cm，脉冲时间200μs,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于4℃静置21h,然后依次在2℃冷藏3d,-4℃冷冻2d、-16℃冷冻12h,立即放在室外于光照强度2万Lx自然光照6h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径1.0mm,接着加入粉碎物质量5倍的水，用乳酸调节pH值为4.5；最后加入混合料液质量1.5％的混合酶，首先于42℃酶解20min,然后于55℃酶解30min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为20％即得植物提取物；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶按质量比9:6:3:2:1.5均匀混合。

4.蜂蛹虫酶解物的制备：

所述蜂蛹虫酶解物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜蜂王幼虫与雄蜂蛹按质量比3:2均匀混合，加入混合物质量1.5倍的质量百分比为6％的丝胶肽溶液和0.2倍的离子溶液，搅拌均匀，于-20℃冷冻15min，破碎，破碎率为99％，破碎物粒径250μm，用乳酸调节破碎物pH值为6，升温至45℃，向其中加入破碎物质量0.4％的复配酶，混合均匀，于真空度-0.08MPa脱气脱腥12min，继续酶解12min得到酶解液；将酶解液置真空离心机中6000r/min真空离心9min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、水解液和残渣，将得到的乳状液控制温度为50℃，添加乳状液质量0.3％的生物破乳剂破乳30min,破乳后于5000r/min真空离心2次，间隔时间2h，每次离心12min，合并三次离心得到的水解液，取其质量0.6％的蛋清，放入搅拌机中于转速900r/min搅拌11min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入合并得到的水解液中，常压煮沸3min,降至室温，于6000r/min真空离心9min，收集水解液，依次经硅藻土过滤、超滤、冻干即得蜂蛹虫酶解物；

所述离子溶液为含有钠离子18mg/L、锌离子12mg/L、钾离子10mg/L、钙离子8mg/L和镁离子6mg/L的水溶液；

所述复配酶质量组成为：风味蛋白酶:酸性蛋白酶:脂肪酶＝2:1.5:0.2；

所述真空离心条件为温度6℃、真空度-0.03MPa；

所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类:胞壁结合类＝4:2:1.5；

所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝7:4。

以下实施例2-6所使用的膳食纤维粉、小麦芽粉、植物提取物、蜂蛹虫酶解物均为实施例1制备。

实施例2

一种功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：

大豆分离蛋白70份，浓缩乳清蛋白70份，膳食纤维粉55份，小麦芽粉30份，磷脂20份，抗冻多肽15份，蜂蛹虫酶解物10份，甜叶菊2份；

所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝21:6；

制备方法，包括如下步骤：

1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于300W、30KHz清洗4min，沥干，置微波干燥中于功率4kW、料层厚度3cm、90℃、干燥3min，然后浸泡在质量百分比为6％的丝胶肽溶液中12min,取出，于-20℃冷冻20min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径0.4mm,接着加入粉碎物质量10倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min；然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取10min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.4％的降解酶，于45℃酶解40min，取酶解液质量3％的蛋清，放入搅拌机中于转速900r/min搅拌11min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸2min,迅速降至室温，90目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至10％得甜叶菊提取物；

所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比2:1.5:1.5均匀混合；

2)混料：将抗冻多肽质量的50％和膳食纤维粉质量的5％依次加入甜叶菊提取物中，均匀混合，在功率400W,频率40KHz条件下进行超声溶解12min,得混合液；

3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-45℃，并在-45℃下预冻2.5h；然后将冻干仓内抽真空至18Pa后，在9h内逐步升温并控制混合液最终温度在-16℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在6h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。

实施例3

一种功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白50份，浓缩乳清蛋白60份，膳食纤维粉45份，小麦芽粉20份，磷脂10份，抗冻多肽10份，蜂蛹虫酶解物5份，甜叶菊1份；

所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝12:3；

制备方法，包括如下步骤：

1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.1％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、20KHz清洗3min，沥干，置微波干燥中于功率3kW、料层厚度2cm、80℃、干燥2min，然后浸泡在质量百分比为4％的丝胶肽溶液中10min,取出，于-18℃冷冻15min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3cm，粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量8倍的水，用乳酸调节pH值为3.5，于室温下在电场强度25kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理10min；然后于室温在功率150W条件下进行微波辐照提取8min，同时在功率200W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.2％的降解酶，于40℃酶解30min，取酶解液质量2％的蛋清，放入搅拌机中于转速800r/min搅拌10min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸1min,迅速降至室温，80筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至8％得甜叶菊提取物；

所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比1:1:1均匀混合；

2)混料：将抗冻多肽质量的40％和膳食纤维粉质量的4％依次加入甜叶菊提取物中，均匀混合，在功率300W,频率35KHz条件下进行超声溶解10min,得混合液；

3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-40℃，并在-40℃下预冻2h；然后将冻干仓内抽真空至15Pa后，在8h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在5h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。

实施例4

一种功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：大豆分离蛋白90份，浓缩乳清蛋白80份，膳食纤维粉65份，小麦芽粉40份，磷脂30份，抗冻多肽20份，蜂蛹虫酶解物15份，甜叶菊3份；

所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝29:9；

制备方法，包括如下步骤：

1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于400W、40KHz清洗5min，沥干，置微波干燥中于功率5kW、料层厚度4cm、100℃、干燥4min，然后浸泡在质量百分比为7％的丝胶肽溶液中15min,取出，于-22℃冷冻25min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量12倍的水，用乳酸调节pH值为5.5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理15min；然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取12min，同时在功率300W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.6％的降解酶，于50℃酶50min，取酶解液质量4％的蛋清，放入搅拌机中于转速1000r/min搅拌12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸3min,迅速降至室温，100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至12％得甜叶菊提取物；

所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比3:2:2均匀混合；

2)混料：将抗冻多肽质量的60％和膳食纤维粉质量的6％依次加入甜叶菊提取物中，均匀混合，在功率500W,频率45KHz条件下进行超声溶解15min,得混合液；

3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-50℃，并在-50℃下预冻3h；然后将冻干仓内抽真空至20Pa后，在10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-18℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。

实施例5

一种功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：

大豆分离蛋白60份，浓缩乳清蛋白65份，膳食纤维粉50份，小麦芽粉25份，磷脂15份，抗冻多肽13份，蜂蛹虫酶解物8份，甜叶菊1.5份；

所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝12:9；

本发明还提供了上述功能性复合蛋白粉的制备方法，包括如下步骤：

1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.1％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于400W、20KHz清洗5min，沥干，置微波干燥中于功率3kW、料层厚度4cm、80℃、干燥4min，然后浸泡在质量百分比为4％的丝胶肽溶液中15min,取出，于-22℃冷冻15min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量12倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10min；然后于室温在功率300W条件下进行微 波辐照提取8min，同时在功率300W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.6％的降解酶，于40℃酶解50min，取酶解液质量2％的蛋清，放入搅拌机中于转速1000r/min搅拌10min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸1min,迅速降至室温，100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至8％得甜叶菊提取物；

所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比1:2:1均匀混合；

2)混料：将抗冻多肽质量的40％和膳食纤维粉质量的6％依次加入甜叶菊提取物中，均匀混合，在功率300W,频率45KHz条件下进行超声溶解10min,得混合液；

3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-40℃，并在-50℃下预冻2h；然后将冻干仓内抽真空至20Pa后，在8-10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。

实施例6

一种功能性复合蛋白粉，主要由以下重量份数的原料制备：

大豆分离蛋白80份，浓缩乳清蛋白75份，膳食纤维粉60份，小麦芽粉35份，磷脂25份，抗冻多肽17份，蜂蛹虫酶解物12份，甜叶菊2.5份；

所述抗冻多肽的质量组成为：植物提取物:丝胶肽＝29:3；

制备方法，包括如下步骤：

1)甜叶菊提取物的制备：按照配方，准确称取各组份原料，首先将甜叶菊放入装有0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗3min，沥干，置微波干燥中于功率5kW、料层厚度2cm、100℃、干燥2min，然后浸泡在质量百分比为7％的丝胶肽溶液中10min,取出，于-22℃冷冻15min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量12倍的水，用乳酸调节pH值为3.5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10min；然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取8min，同时在功率300W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.6％的降解酶，于40℃酶解50min，取酶解液质量2％的蛋清，放入搅拌机中于转速1000r/min搅拌10min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸3min,迅速降至室温，80目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至12％得甜叶菊提取物；

所述降解酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比3:1:2均匀混合；

2)混料：将抗冻多肽质量的60％和膳食纤维粉质量的4％依次加入甜叶菊提取物中，均 匀混合，在功率500W,频率35KHz条件下进行超声溶解15min,得混合液；

3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-50℃，并在-40℃下预冻3h；然后将冻干仓内抽真空至15Pa后，在10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下依次与大豆分离蛋白、浓缩乳清蛋白、小麦芽粉、磷脂、蜂蛹虫酶解物、剩余抗冻多肽、剩余膳食纤维粉均匀混合得功能性复合蛋白粉。

实施例7本发明功能性复合蛋白粉的感官品评试验

邀请24名人员对本发明实施例2制备的功功能性复合蛋白粉与市售两种同类相同生产日期的功能性复合蛋白粉进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、老年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半；打分包括外观(20分)、质地(25分)、风味(30分)、口感(25分)四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表1：

表1：感官品评统计结果

注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，标不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)，标有相同字母表示差异不显著(P＞0.05)。

以上结果表明，本发明制备的功能性复合蛋白粉从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售冻干粉，特别是外观、风味和口感极好，最大限度地保留了食品原料的天然色泽、口感和风味，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。

需要说明的是：本发明实施例3-6制备的功能性复合蛋白粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

实施例8本发明功能性复合蛋白粉的生物活性试验

将本发明实施例2制备的功能性复合蛋白粉与市售相同生产日期的粉状糖化酶分别于-12℃和40℃条件下储存12个月，采用《GB8726-2006食品添加剂糖化酶制剂》中检测方法测定蛋白粉和粉状糖化酶的酶活力，计算酶活损失率，酶活损失率是指实际检测的酶活力与产品标注酶活力的差值占标注酶活力的百分率，结果如表2

表2储存期酶活力损失率

以上结果表明，在-12℃和40℃条件下储存12个月，本发明功能性功能性复合蛋白粉比市售粉状糖化酶酶活损失分别降低34％和10.2％，具有优良的温度储存性，酶活力非常稳定，同时也说明本发明功能性功能性复合蛋白粉含有的其它生物活性物质的损失率极低，具有较好的抗冻、抗热性能，保质期长。

需要说明的是：本发明实施例3-6制备的功能性复合蛋白粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

实施例9本发明功能性复合蛋白粉溶解性试验

蛋白粉作为一种食品原料制备的粉剂，参照固体饮料的稳定性标准，将溶解时间、溶解后均一性确定为蛋白粉的质量稳定性指标，它不仅直接反映了产品的溶解程度，亦反映了产品内在质量及稳定性，是蛋白粉最重要质控指标。

溶解时间：按质量比1:5加入55-65℃温水，充分搅拌，完全溶解的时间；

均一性表征方法：上下均一、无分层90-100分；微分层80-89分；分层70-79分；较分层0-69分；严重分层50-59分；沉淀49分以下(沉淀颗粒越大、数量越多，分数越低)。

将本发明实施例2制备的功能性复合蛋白粉和市售同类型、同规格、同生产日期的功能性复合蛋白粉于玻璃杯中溶解后，静置，观察均一性，每5min观察记录结果一次，结果见表3：

表3：溶解后功能性复合蛋白粉澄明度检测结果

以上结果表明：本发明功能性复合蛋白粉和市售功能性复合蛋白粉相比，溶解性较好，溶解时间短，溶解后的溶液稳定性强，均一性强，外观质量较好，随着静置时间的延长，市售功能性复合蛋白粉溶液液相相对不稳定，产生沉淀，大大影响了饮料的外观质量和内在质量，同时也说明本发明功能性复合蛋白粉内在质量较好，食用效果安全、稳定。

需要说明的是：本发明实施例3-6制备的功能性复合蛋白粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

实施例10本发明功能性复合蛋白粉对机体免疫力的影响

1实验目的

通过运动耐力测试(小鼠游泳试验)，验证本发明功能性复合蛋白粉的提高免疫力、抗疲劳作用。

2实验材料与试剂

2.1供试药物：

市售功能性复合蛋白粉(G1)；市售功能性复合蛋白粉(G2)；本发明实施例2-6制备的功能性复合蛋白粉(G3-G7)。

2.2试剂：

肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所；浓硫酸(AR)，南京化学试剂有限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。

3.实验动物

ICR小鼠，♂，清洁级，体重18-22g，由宁夏医科大学比较医学中心提供，实验期间小鼠自由饮食。

4.主要仪器

铝制游泳箱(50cm×50cm×40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公司；水浴锅：DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称：BS224S型，Sartorius公司；秒表，温度计

5.实验分组

5.1剂量分组及受试样品给予时间随机将小鼠分为8组，每组10只，第1组至第7组分 别给G1～G7的药物，第8组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。

5.2样品配制第1组至第7组：称取2.25g药物样品，用蒸馏水配至150ml；空白对照组：双蒸水150ml。

6.实验方法

6.1负重游泳实验末次给药30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水温25±1℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮，记录小鼠游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。

6.2小鼠血清尿素测定末次给药30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采血0.5mL(不加抗凝剂),置4℃冰箱3h,血凝固后2000r/min离心15min,取血清送宁夏医科大学附属医院检验科检测。

6.3肝糖原的测定末次给药30min后，在温度为25±1℃的水中不负重游泳90min，颈椎脱臼处死小鼠，用生理盐水洗净，并用滤纸吸干水分后，准确称取肝脏100mg，肝糖原检测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。

6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。乳酸仪测定方法：分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。(血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后20min的血乳酸值)

7.观察指标负重游泳时间，血乳酸、尿素、肝糖原值

8.统计方法实验数据用表示，采用t检验进行组间比较

9.实验结果

9.1本发明功能性复合蛋白粉对小鼠体重的影响

各组小鼠在给予G1～G9药物后，前、中，后期体重分别见下表所示,各组小鼠的初始体重和增重体重与对照组比较均无统计学差异(P＞0.05)，表明G1～G9药物均无明显的毒性。实验结果详见表4。

表4负重游泳实验小鼠的初始体重、中期体重和结束体重

9.2本发明功能性复合蛋白粉对小鼠负重游泳时间的影响

经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，可以明显延长小鼠负重游泳时间，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明功能性复合蛋白粉G3～G7药物与空白对照组比较，可以显著延长小鼠负重游泳时间，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表5。

表5功能性复合蛋白粉对小鼠负重游泳时间的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

9.3本发明功能性复合蛋白粉对小鼠运动前后血乳酸的影响

经口给予小鼠本发明的功能性复合蛋白粉后，本发明功能性复合蛋白粉G3～G7药物对小鼠运动后血乳酸曲线下面积与对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，G1～G2药物组小鼠血乳酸曲线下面积与对照组比较虽有所降低，但并无统计学差异(P＞0.05)。结果见表6。

表6本发明功能性复合蛋白粉对小鼠运动前后血乳酸水平的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

9.4本发明功能性复合蛋白粉对小鼠肝糖原的影响

经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明功能性复合蛋白粉G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表7。

表7本发明功能性复合蛋白粉对小鼠肝糖原含量的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

9.5本发明功能性复合蛋白粉对小鼠血清尿素的影响

经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物组与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明功能性复合蛋白粉G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表8。

表8本发明功能性复合蛋白粉对小鼠血清尿素含量的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

10.实验结论

本实验主要通过小鼠负重游泳实验，同时检测小鼠肝糖原的储备来观察本发明功能性复合蛋白粉提高免疫力、抗疲劳的效果。初步研究结果显示如下：

1、本发明G3～G7功能性复合蛋白粉均能延长小鼠负重游泳时间(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的功能性复合蛋白粉。

2、生化检测方面显示，本发明G3～G7功能性复合蛋白粉各剂量组均能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，而其它G1～G2的功能性复合蛋白粉虽然也能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，但与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)；

3、本发明G3～G7功能性复合蛋白粉各剂量组均能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的功能性复合蛋白粉；

4、高尿酸模型发现，本发明G3～G7功能性复合蛋白粉能显著降低小鼠游泳后血清中尿素的含量(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2功能性复合蛋白粉；

11.结论

上述实验证明本发明功能性复合蛋白粉能显著提高机体免疫力，提高小鼠的体力和耐力，降低小鼠运动后血清中尿素及乳酸的含量，且能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备，有助于缓解运动负荷引起的疲劳；能延长小鼠负重游泳至力竭的时间。

本文标签： 蛋白粉制备方法功能