一种蓝莓功能饮料组合物

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本发明提供一种蓝莓功能饮料组合物，按照体积百分比由蓝莓汁5～40%、枸杞提取液1～20%、五味子0.5～5%提取液及余量的水组成。其中所述的蓝莓汁是蓝莓鲜果压榨所得。本发明的蓝莓功能饮料组合物通过简单的复配工艺，使蓝莓、枸杞和五味子在耐缺氧、抗疲劳、抗氧化、抗肿瘤等各方面的效果相互增强，超过单味组分在各个方面的效果的单纯加和。因此，本发明的上述组合物显示了非常良好的复配效果，动物实验显示，具有显著的抗氧化、抗疲劳、提高免疫力、清除自由基的作用，且配方和制备工艺简单，使用方便，未见毒副作用。

1.一种蓝莓功能饮料组合物，按照体积百分比由以下组分组成：其中所述的蓝莓汁是蓝莓鲜果压榨所得。 2.权利要求1所述的蓝莓功能饮料组合物，其特征在于所述组合物按照体积百分比由蓝莓汁25～35%、枸杞提取液5～15%、五味子提取液1～2%以及余量的水组成。 3.权利要求2所述的蓝莓功能饮料组合物，其特征在于，按照体积百分比由蓝莓汁30%、枸杞提取液10%、五味子提取液1%以及余量的水组成。 4.权利要求1、2或3所述的蓝莓功能饮料组合物，其特征在于，所述的枸杞提取液通过下述方法制备：①枸杞和50%乙醇按料液比1g:20ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇得枸杞提取液I；②滤渣和50%乙醇按料液比1g:10ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇得枸杞提取液II；③合并枸杞提取液I和枸杞提取液II即为枸杞提取液。 5.权利要求1、2或3所述的蓝莓功能饮料组合物，其特征在于，所述的五味子提取液通过下述方法制备：①五味子和70%乙醇按料液比1g:20ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇得五味子提取液I；②滤渣和70%乙醇按料液比1g:10ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇得五味子提取液II③合并五味子提取液I和五味子提取液II即为五味子提取液。

背景技术

蓝莓（blueberry）为杜鹃花科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium spp.）常绿灌木， 是原产于北美洲的一种具有较高经济价值的越橘类浆果，其果皮呈蓝色或蓝黑色故称 蓝莓，现多为栽培。蓝莓果实营养丰富，除含有常规的糖、氨基酸、膳食纤维外，还 富含维生素E、维生素A和维生素B以及铁、锌、钾、锰等微量元素，另外其含有的 花青素具有抗氧化、消除视疲劳、增强心脏功能、提高免疫力、清除自由基、延缓衰 老及抗癌等多种生理活性。

枸杞子为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实。其味甘、性平 具有补肝益肾之功效，《本草纲目》中说“久服坚筋骨，轻身不老，耐寒暑……补精气 诸不足，易颜色，变白，明目安神，令人长寿”。中医常用它来治疗肝肾阴亏、腰膝酸 软、头晕、健忘、目眩、目昏多泪、消渴、遗精等病症。现代药理学研究证实枸杞子 可调节机体免疫功能、能有效抑制肿瘤生长和细胞突变、具有延缓衰老、抗脂肪肝、 调节血脂和血糖、促进造血功能等方面的作用，并应用于临床。

五味子Schisandra chinensis(Turcz)Ball．为木兰科植物五味子的干燥成熟果实， 《神农本草经》列为上品，唐《新修本草》载“五味皮肉甘酸，核中辛苦，都有咸味”， 故名五味子。为木兰科植物五味子的成熟果实，习称“北五味子”；同科植物华中五味 子习称“南五味子”。李时珍谓：“五味今有南北之分南产者色红，北产者色黑，入滋补 药必用北产者良”。通常说的为“北五味子”，是著名的滋补性中药，具有多种功效，包 括抗氧化、抗衰老抗疲劳等。

目前开发的蓝莓的功能产品多以花青素为主。但在蓝莓复方的保健功能性方面研 究较少，也未见突出的产品。

发明内容

本发明目的在于提供一种蓝莓功能饮料组合物，按照体积百分比由以下组分组成：

其中所述的蓝莓汁是蓝莓鲜果压榨所得。

作为优选，所述组合物按照体积百分比由蓝莓汁25～35%、枸杞提取液5～15%、 五味子提取液1～2%以及余量的水组成。最为优选地，所述的蓝莓功能饮料组合物按 照体积百分比由蓝莓汁30%、枸杞提取液10%、五味子提取液1%以及余量的水组成。

上述本发明所述的蓝莓功能饮料组合物中所述的枸杞提取液通过下述方法制备：

①枸杞和50%乙醇按料液比1g:20ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇得 枸杞提取液I；

②滤渣和50%乙醇按料液比1g:10ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇得 枸杞提取液II；

③合并枸杞提取液I和枸杞提取液II即为枸杞提取液。

上述本发明所述的蓝莓功能饮料组合物中所述的五味子提取液通过下述方法制 备：

①五味子和70%乙醇按料液比1g:20ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇 得五味子提取液I；

②滤渣和70%乙醇按料液比1g:10ml混合浸泡8～24h，抽滤后，滤液旋蒸除醇得 五味子提取液II

③合并五味子提取液I和五味子提取液II即为五味子提取液。

最为优选地，本发明所述的蓝莓功能饮料组合物由30%蓝莓汁、10%枸杞提取液、 1%五味子提取液以及余量的水组成。其中比例均指按照体积百分比。

本发明的蓝莓功能饮料组合物通过简单的复配工艺，使蓝莓、枸杞和五味子在耐 缺氧、抗疲劳、抗氧化、抗肿瘤等各方面的效果相互增强，超过单味组分在各个方面 的效果的单纯加和。因此，本发明的上述组合物显示了非常良好的复配效果，动物实 验显示，具有显著的抗氧化、抗疲劳、提高免疫力、清除自由基的作用，且配方和制 备工艺简单，使用方便，未见毒副作用。

具体实施方式

下述实施例以本发明所述的最为优选的技术方案所述的蓝莓功能饮料组合物为 例。

实施例1

蓝莓功能饮料组合物的制备方法：

蓝莓使用市售蓝莓鲜果；枸杞和五味子使用市售药材。

1、制备蓝莓汁：蓝莓鲜果压榨果汁，以10g鲜蓝莓：7mL蓝莓汁的产出比例控 制压榨程度。

2、制备枸杞提取液：

①枸杞和50%乙醇按料液比1g:20ml混合浸泡过夜（约12h），抽滤后，滤液旋 蒸除醇得枸杞提取液I；

②滤渣和50%乙醇按料液比1g:10ml混合浸泡过夜（约12h），抽滤后，滤液旋 蒸除醇得枸杞提取液II；

③合并枸杞提取液I和枸杞提取液II即为枸杞提取液。

3、制备五味子提取液：

①五味子和70%乙醇按料液比1g:20ml混合浸泡过夜（约12h），抽滤后，滤液 旋蒸除醇得五味子提取液I；

②滤渣和70%乙醇按料液比1g:10ml混合浸泡过夜（约12h），抽滤后，滤液旋 蒸除醇得五味子提取液II

③合并五味子提取液I和五味子提取液II即为五味子提取液。

4、组合物复配：按照体积份数，将上述制备的蓝莓汁30份、枸杞提取液10份、 五味子提取液1份以及水59份充分混合，即得蓝莓功能饮料组合物。

实施例2

蓝莓功能饮料组合物（实施例1制得）耐缺氧效果实验：

（1）实验方法

昆明小鼠80只，雌雄各半，随机分为4组，每组20只，分别设为阴性对照组、 阳性对照组、低剂量测试组和高剂量测试组。

所有测试组所处环境条件一致，温度25±1℃，相对湿度70%，自然光照，小鼠 自由摄食（标准饲料，GB14924.3-2001）和饮水，灌胃给药，给药条件为：

阴性对照组：生理盐水20ml/kg；

阳性对照组：市售红牛饮料20ml/kg；

高剂量测试组：实施例1所制备的蓝莓功能饮料组合物20ml/kg；

低剂量测试组：实施例1所制备的蓝莓功能饮料组合物10ml/kg。

（2）检测耐缺氧时间：每组小鼠随机取10只，在第14天给药后禁食4小时，将 每组小鼠分别置于装有碱石灰15克的250ml密闭广口瓶中，凡士林密封，观察小鼠停 止呼吸时间。结果见下表1：

表1蓝莓组合物对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响（X±SD，n=10）

注：与阴性对照组比较**P<0.01，与阳性对照组比较△P<0.05

从表1的结果可见：本发明的蓝莓功能饮料组合物高、低剂量组均能有效延长小 鼠常压耐缺氧存活时间。与阳性对照相比，具有统计学意义。

（3）检测生化指标：每组剩余的小鼠在第14天给药后禁食4小时，将每组小鼠 分别置于装有碱石灰15克的250ml密闭广口瓶中，凡士林密封，10分钟后摘眼球取 血，测定血糖含量；离心取血清，按试剂盒说明书测定小鼠血乳酸含量、血清尿素氮 含量。结果如表2所示。

表2蓝莓组合物对小鼠常压耐缺氧后生化指标的影响（X±SD，n=10）

注：与阴性对照组比较*P<0.05，**P<0.01，与阳性对照组比较△P<0.05，△△P<0.01

从表2的检测结果可见：与阴性对照组相比，本发明的蓝莓功能饮料组合物高、 低剂量组均能有效地降低小鼠常压耐缺氧后血乳酸、血清尿素氮和血糖，并有统计学 意义（P<0.01）；与阳性对照比较，高剂量和低剂量组能降低小鼠常压耐缺氧后血乳 酸和血糖（P<0.05），高剂量能降低小鼠血清尿素氮（P<0.01）。

实施例3

蓝莓功能饮料组合物（实施例1制得）的抗疲劳效果测试

1、对小鼠握力的影响实验

（1）实验方法：

昆明小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，分别为阴性对照组、阳 性对照组、组合物测试组、蓝莓汁测试组、枸杞提取液测试组、五味子提取液测试组， 各组环境条件一致，温度25±1℃，相对湿度70%，自然光照，小鼠自由摄食（标准饲 料，GB14924.3-2001）和饮水。灌胃给药，给药条件为：

阴性对照组：生理盐水20ml/kg；

阳性对照组：市售红牛饮料20ml/kg；

组合物测试组：实施例1所制备的蓝莓功能饮料组合物10ml/kg；

蓝莓汁测试组：实施例1步骤1所制备的蓝莓汁10ml/kg；

枸杞提取液测试组：实施例1步骤2所制备的枸杞提取液10ml/kg；

五味子提取液测试组：实施例1步骤3所制备的五味子提取液10ml/kg

给药前3d，每天将小的2个前爪放在距地面高0.5m、长1.2m的细绳上训练小鼠。 停药后第24小时，将小鼠放在细绳上，记录其力竭落地时间。

（2）实验结果，检测结果如表3所示：

表3蓝莓组合物对小鼠握力的作用（X±SD，n=10）

注：与阴性对照组比较**P<0.01，与阳性对照组比较△△P<0.01，△P<0.05。

从表3的检测结果可见：本发明的蓝莓组合物组均能有效延长小鼠落地时间，与 阴性对照组、阳性对照和各单味组分相比，均具有统计学意义。

2、对小鼠力竭游泳时间的影响

（1）实验方法：

昆明小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，分别为阴性对照组、阳 性对照组、蓝莓组合物测试组、蓝莓汁测试组、枸杞提取液测试组、五味子提取液测 试组，各组环境条件一致，温度25±1℃，相对湿度70%，自然光照，小鼠自由摄食（标 准饲料，GB14924.3-2001）和饮水。灌胃给药，给药条件为：

阴性对照组：生理盐水20ml/kg；

阳性对照组：市售红牛饮料20ml/kg；

组合物测试组：实施例1所制备的蓝莓功能饮料组合物10ml/kg；

蓝莓汁测试组：实施例1步骤1所制备的蓝莓汁10ml/kg；

枸杞提取液测试组：实施例1步骤2所制备的枸杞提取液10ml/kg；

五味子提取液测试组：实施例1步骤3所制备的五味子提取液10ml/kg

在第14天小鼠末次灌胃给药1小时后，在尾部系一其体重10%的铅皮，放入直 径120cm，高度40cm的水箱中，以小鼠头部全部沉入持续10秒不能浮出水面为力竭 游泳时间。

（2）实验结果，如表4：

表4组合物对小鼠力竭游泳时间的影响（X±SD，n=10）

注：与阴性对照组比较**P<0.01，与阳性对照组比较△△P<0.01

从表4结果可见：本发明的蓝莓组合物测试组能有效延长小鼠游泳时间，与阴性 对照组、阳性对照和各单味组分相比，均具有统计学意义。

实施例4

蓝莓功能饮料组合物（实施例1制得）的抗氧化效果测试

（1）实验方法：

无菌操作下取出胎龄15天的昆明小鼠胚胎，分离出两侧大脑皮层，然后在 DMEM/F12中机械吹打以破碎组织。1000r离心机械分离后的细胞悬液10min，除去 组织细胞碎片。弃上清液，计数重悬后的细胞并接种到多聚赖氨酸(20μg/ml)预包被的 24孔培养板中，细胞接种密度为1×105/孔。本研究选用DMEM/F12外加10%灭活胎 牛血清、100U/ml青霉素，100U/ml链霉素作为细胞培养液。细胞培养48小时后，加 入10μMβ-阿拉伯糖呋喃糖苷(β-D-arabinofuranoside)以抑制胶质细胞增殖。再过48小 时，用新鲜的细胞培养液置换出旧的培养液。培养的第7天，细胞用于实验（纯神经 元培养体系中大脑皮层神经元纯度≥95%）。分别加不同样品于培养基中，每个浓度设 6个孔，培养48h后检测内源性抗氧化物谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX），超氧化物 歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）的含量或活性。具体每组细胞给药条件如下：

阴性对照组：生理盐水50μl/孔；

阳性对照组：市售红牛饮料50μl/孔；

组合物测试组：实施例1所制备的蓝莓功能饮料组合物50μl/孔；

蓝莓汁测试组：实施例1步骤1所制备的蓝莓汁50μl/孔；

枸杞提取液测试组：实施例1步骤2所制备的枸杞提取液50μl/孔；

五味子提取液测试组：实施例1步骤3所制备的五味子提取液50μl/孔

（2）实验结果：

蓝莓功能饮料组合物对小鼠神经细胞的抗氧化效果见表5。

表5组合物对小鼠神经细胞的抗氧化作用的影响

注：与阴性对照组比较*P<0.05，**P<0.01，与阳性对照组比较△△P<0.01

从表5的结果可见：与阳性对照组相比，组合物能升高GSH-PX，SOD和GSH， 效果极显著（P<0.01）；蓝莓汁对GSH-PX和GSH的作用效果，具有统计学意义 （P<0.05）；其他各组无明显抗氧化效果。

实施例5

蓝莓组合物的抗肿瘤效果实验

（1）实验方法：

以MTT法检测样品对肿瘤细胞的抑制率：细胞以1×105个/ml的浓度接种于24 孔板中，每孔1000μl，培养24h后分别加不同样品于培养基中，每种样品加入50μl， 培养48h后检测样品对以下4种肿瘤细胞生长的抑制率。采用MTT比色法检测。MTT 是一种四甲基偶氮唑盐，被活细胞摄入后，在细胞内形成蓝紫色结晶甲瓒。甲瓒用 DMSO溶解，在酶标仪上进行比色，所检测OD值的大小可反映细胞代谢活性的强弱。 检测时每孔加10μl MTT（终浓度为0.5mg/ml）于5%CO2，37℃培养箱中培养3h。 吸去培养液，每孔中再加入100μl二甲基亚砜（DMSO）溶解蓝紫色结晶物，振荡待 结晶物充分溶解后用酶标仪测定570nm，参考波长为630nm的OD值，计算样品对细 胞生长的抑制率。具体每组细胞给药条件如下：

阴性对照组：生理盐水50μl/孔；

阳性对照组：市售红牛饮料50μl/孔；

组合物测试组：实施例1所制备的蓝莓功能饮料组合物50μl/孔；

蓝莓汁测试组：实施例1步骤1所制备的蓝莓汁50μl/孔；

枸杞提取液测试组：实施例1步骤2所制备的枸杞提取液50μl/孔；

五味子提取液测试组：实施例1步骤3所制备的五味子提取液50μl/孔。

抑制率=（OD空白对照-OD加药）/OD空白对照×100%

表6组合物对肿瘤细胞的抑制率%

注：与阴性对照组比较*P<0.05，**P<0.01，与阳性对照组比较△△P<0.01，△P<0.05

从表6的结果可以看出，阳性对照组无明显抗肿瘤效果，不同检测样品与肿瘤细 胞培养48小时后，对肿瘤细胞的生长有不同的抑制效果。其中，组合物对NCI-H446 （人小细胞肺癌），SMMC-7721（人肝癌），MCF-7（乳腺癌）和BGC-823（人胃癌） 均有明显的抗肿瘤活性作用，而枸杞子提取液对三种细胞无明显活性作用；蓝莓汁和 五味子提取液对SMMC-7721细胞有15.0%和12.2%的抑制率，对其他肿瘤细胞无明显 抑制作用。

本文标签： 组合蓝莓饮料功能