一种肉鸡饲料添加剂

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本发明公开了一种肉鸡饲料添加剂，制得的该肉鸡饲料添加剂由达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物和菊粉按质量比混合组成，其中，达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物占80%，菊粉占20%。采用本发明的肉鸡饲料添加剂，在基础日粮中添加3%，对肉鸡生长、抗氧化及增强免疫等均有显著的作用，效果好于市售的饲料添加剂。

1.一种肉鸡饲料添加剂，其特征在于，制得的该肉鸡饲料添加剂由达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物和菊粉按质量比混合组成，在基础日粮中的添加量为3％，其中，达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物占80％，菊粉占20％；所述的达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物按照下列步骤制备：步骤一，采尖叶胡枝子全草及达乌里胡枝子全草，风干，粉碎；步骤二，尖叶胡枝子草粉与达乌里胡枝子草粉等比例混合，用质量百分数70％的乙醇浸提48h后浓缩；步骤三，将浓缩液依次用乙酸乙酯萃取，分别得到乙酸乙酯部与水部；步骤四，将所得的乙酸乙酯部减压，浓缩，干燥，粉碎，即得到乙酸乙酯部，其中富集极性小的黄酮类；步骤五，将步骤三的水部用正丁醇萃取，分别得到正丁醇部与水部；步骤六，将所得到的正丁醇部减压浓缩，干燥，粉碎，得到正丁醇部，其中富集极性大的黄酮类化合物；将乙酸乙酯部与正丁醇部一起混匀，即得到达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物。

技术领域

本发明涉及一种饲料添加剂，尤其是一种利用绿色无毒的植物源（优质 牧草）为原料生产的抗氧化、增强免疫及促生长的肉鸡饲料添加剂。

背景技术

由于集约化饲养、生态环境变差以及近年来全球性疫病的爆发，使人们 对鸡肉的安全性、鸡肉品质等问题更加关注。特别是近几十年来，由于家禽 育种和营养方面的进展，家禽的生产性能得以不断提高，现代家禽育种中对 生产性能的过分追求导致当前家禽品系（种）的肉品质量降低、抗病力变差、 对环境应激敏感等。各种饲料添加剂的广泛应用虽然使这些问题得到了一定 程度上的解决，但是机体内的有害物质残留量升高的问题却难以解决。随着 生活水平的进一步提高，人们对畜产品的品质和安全性的要求会越来越高， 为了保证畜产品的安全性，迎合人们崇尚绿色食品的心理，安全、功能性绿 色植物源添加剂的研究与开发已成为必然。

随着机体的衰老，肉鸡一般在生长中后期机能衰退、抗氧化能力减弱， 出现代谢紊乱，自由基过剩。根据衰老的自由基学说，机体内脂质过氧化作 用不断加剧，过氧化的终产物丙二醛（MDA）等物质的含量不断增加，而相 应自由基的清除剂超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽还原酶（GR）的活性 逐渐降低，进而导致细胞生理功能的减退，使生长机能下降。因此，减少脂 质过氧化物的产生，提高机体的抗氧化能力，寻找能清除体内过量自由基的 外源植物活性成分成为人们研究关注的热点。近年来，关于从植物中提取黄 酮类物质作为一种饲料添加剂添加到动物日粮中的研究日益增多。孟婷等报 道，给产蛋鸡饲喂大豆黄酮，可使其血液中的孕酮、T3、T4的水平明显升高， 提高产蛋鸡的生产性能。张金枝等给断奶仔猪日粮添加竹叶黄酮，对仔猪的 生产性能有明显的促进作用。王国杰报道3mg/kg大豆黄酮能显著提高雄性 肉仔鸡日增重，使胸肌和腿肌重显著提高，RNA/DNA比率增加，血清尿酸水 平显著下降。谢棒祥等在肉鸡上的试验证明黄酮类化合物能有效降低血清中 胆固醇（TC）及甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）含量，显著提高高 密度脂蛋白（HDL-C）水平，有效调节动物的脂质代谢。Tsai等报道大豆异 黄酮具有降低血浆脂质过氧化物和肝脏脂质过氧化物的作用，节省了维生素 E和内源抗氧化物质。

最近几年有关黄酮类化合物的大量研究表明，黄酮类化合物主要有以下 几种生物学功能：a）黄酮类化合物具有促生长作用；b）对动物的脂质代谢 具有调节作用，能防止脂肪沉积，降低肉鸡腹脂率；c）黄酮类化合物对内 分泌有影响，黄酮类化合物能够促进胰岛β细胞的恢复，降低血糖和血清胆 固醇，改善糖耐量，对抗肾上腺素的升血糖作用，同时它能够抑制醛糖还 原酶；d）黄酮类化合物能增强机体的非特异免疫功能和体液免疫功能；e） 黄酮类化合物具有抗氧化性能，能清除过氧化氢和超氧离子；f）黄酮类化 合物还具有抗菌抗病毒作用。

申请人对达乌里及尖叶胡枝子全草的化学成分进行了分析，其主要成分 为黄酮类化合物。并对提取纯化后的粗黄酮进行了体外抗氧化试验。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种肉鸡饲料添加剂，能够增强肉鸡生产性能、 抗氧化及增强免疫机能，保证肉鸡健康、且鸡肉中没有抗生素残留，为生产 高质量的禽肉产品提供保障。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种肉鸡饲料添加剂，其特征在于，制得的该肉鸡饲料添加剂由达乌里 胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物和菊粉按质量比混合组成，其中，达乌里胡 枝子与尖叶胡枝子混合提取物占80%，菊粉占20%。

上述达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物按照下列步骤制备：

步骤一，采尖叶胡枝子全草及达乌里胡枝子全草，风干，粉碎待用。

步骤二，尖叶胡枝子草粉与达乌里胡枝子草粉等比例混合，用质量百分 数70%的乙醇浸提48h后浓缩；

步骤三，将浓缩液依次用乙酸乙酯萃取，分别得到乙酸乙酯部与水部；

步骤四，将所得的乙酸乙酯部减压，浓缩，干燥，粉碎，即得到乙酸乙 酯部，其中富集极性小的黄酮类；

步骤五，将步骤三的水部用正丁醇萃取，分别得到正丁醇部与水部；

步骤六，将所得到的正丁醇部减压浓缩，干燥，粉碎，得到正丁醇部， 其中富集极性大的黄酮类化合物；

将乙酸乙酯部与正丁醇部一起混匀，即得到达乌里胡枝子与尖叶胡枝子 混合提取物。

采用本发明的肉鸡饲料添加剂，其添加量是基础日粮的3%，所带来的 技术效果是：

1、与现有技术相比，不添加抗生素的天然牧草源的添加剂，更能确保 肉鸡的品质，保证了食品安全，及人类的健康。

2．原料来源绿色，资源丰富，价格低。

国内外研究了数以百计的药草、果蔬的抗氧化活性成分，有的已涉入了 有效成分的分离与分析，但由于资源不足，有效成分低等问题，真正投入生 产、应用的不多。因此有必在在牧草资源中发掘新的原料来源，达乌里胡枝 子与尖叶胡枝子为优质牧草，资源丰富、无毒、价格低、栽培容易，易形成 产业化

3、活性显著，用量低。本课题组的研究结果表明达乌里胡枝子黄酮及 尖叶胡枝子黄酮均具有显著的抗氧化活性，将达乌里胡枝子与尖叶胡枝子两 种粗黄酮混合使用，表现出的活性好且用量更低。两种总黄酮的混合，使黄 酮类化合物的单体更多，结构多样化，有一定的协同作用，故表现出好的活 性。

4、依据两种胡枝子中主要黄酮类化合物的极性大小而设计，工艺简单， 无污染，成本低。由于前期两种胡枝子黄酮类化合物的分离试验过程中得到 结论是乙酸乙酯部富集极性小的黄酮类，而正丁醇部富集极性大的黄酮类化 合物。

具体实施方式

本发明采用牧草达乌里胡枝子及尖叶胡枝子为原料，来制备肉鸡专用添 加剂。申请人已对达乌里及尖叶胡枝子全草的化学成分进行了分析，其主要 成分为黄酮类化合物，并对提取纯化后的粗黄酮进行了体外抗氧化试验。为 本发明提供了强有力科学理论与实践依据。

达乌里胡枝子（Lespedeza daurica）是胡枝子属（Lespedeza Michx.） 草本状半灌木，广泛分部于我国东北、华北、西北、华中至云南；因抗逆性 强，营养丰富，牲畜喜食，该植物是保持水土、改良草地和建植人工草地的 优良豆科牧草。作为生态草和优良牧草，近年来已引起广泛重视。

达乌里胡枝子全草通过乙醇提取、有机溶剂萃取分配，运用硅胶、凝胶、 聚酰胺和薄层层析等方法，分离得到12个化合物，依靠核磁共振谱、红外 光谱、紫外光谱和质谱等光谱解析方法，鉴定了其中11个化合物，分别确 定为：槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷（quercetine-3-O-D-β-galactosid1）、香 叶木素（diosmetin2）、山奈酚（kaempferol3）、柽柳素（tamarixetin4）、 木犀草素（luteolin5）、槲皮素（quercetine6）、表儿茶素（epicatechin7）、 三叶豆苷（trifolin8）、异荭草素（isoorientin9）、芦丁（rutin10）和β- 胡萝卜苷（daucosterol11）。研究结果表明：氧苷黄酮是达乌里胡枝子黄酮 类的主要成分，具有较好的药理活性。

尖叶胡枝子尖叶胡枝子（Lespedeza hedysaroides（Pall.）Kitag.）为胡枝 子属（Lespedeza Michx.）多年生植物，抗逆性强，适应性广，营养丰富， 家畜喜食，羊尤为喜食，是保持水土、改良草地和建植人工草地的优良豆科 牧草。尖叶胡枝子为中旱生植物，气候适应范围广，分布于我国东北地区及 内蒙古、河北、山西等省区，常见于草甸草原带的丘陵坡地、沙质地上，也 出现在栎林边缘的干山坡

根据申请人的研究表明，尖叶胡枝子中的主要黄酮类化合物为荭草素 （1）、异荭草素（2）、牡荆苷（3）、异牡荆苷（4）、异杨梅树皮苷（5）、 槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（6）、木犀草素-7-O-葡萄糖苷（7）、 6-xylopyranosylluteolin（8）；尖叶胡枝子富含有较好药理活性的碳苷黄酮。

申请人对达乌里胡枝子与尖叶胡枝子总黄酮进行了体外抗氧化活性试 验，分别使用Fenton反应法、邻苯三酚自氧化法和碘—硫代硫酸钠滴定法 测定达乌里胡枝子黄酮及尖叶胡枝子黄酮对羟自由基、超氧阴离子的清除作 用和抑制猪油、菜油、亚油酸的氧化酸败作用。结果表明：这两种胡枝子黄 酮对羟自由基、超氧阴离子有较强的清除作用，在一定范围内，清除效果随 质量浓度升高而加强。尖叶胡枝子总黄酮及乌里胡枝子黄酮对猪油、菜油、 亚油酸有极强的抗氧化作用，能够极显著地抑制猪油、菜油POV值升高，极 显著地抑制亚油酸的氧化。

达乌里胡枝子与尖叶胡枝子的黄酮类化合物成分，为胡枝子黄酮的抗氧 化活性提供了强有力的理论依据。黄酮类化合物从结构上看属于多羟基酚类 化合物，其分子结构中富含的羟基性质非常活泼，它们能提供大量的活泼氢， 特别是邻羟基尤为活泼。这就从结构上保证了黄酮类化合物能够与生物有机 体内的氧自由基结合，清除自由基。邻位羟基，尤其是A环5，7位上的邻 位二羟基，非常容易与内体过多的金属离子络合，形成稳定的配位化合物， 借此达到抗氧化的目的。所得的化合物都是带有5，7邻位二羟基的黄酮类 化合物，从而印证了本课题组在达乌里与尖叶胡枝子总黄酮抗氧化活性方面 的研究结果。本实验分离得到的槲皮素和木犀草素除了具有强抗氧化活性 外，还有抗菌作用，他可以直接作用于试验动物消化系统内的微生物菌群， 减少有害菌群，从而改善了试验动物的消化机能；再次，黄酮类化合物可以 增强动物的免疫调节系统，保证了动物的健康生长。

菊粉是由D—果糖经（1，2）键连接而成的低聚糖，末端带有一个葡萄 糖残基，聚合度（DP）为2～60，平均DP在10～12，它在自然界中分布很 广，尤其在菊芋和菊苣中含量丰富。菊糖作为一种天然的功能性多糖，具研 究表明：菊粉具有对动物具有促生长，改善肉品质，调节肠道菌群的作用。 对肠道生理也有一定的影响如：洗脱病原菌、促排泄、保护肠道生理功能。

在现代饲养环境下，应激因子增多，许多外界条件可以影响到肠道菌群。 Freter（1993）认为，影响细菌在肠道内生存和增殖的因素包括胃酸、胆盐、 肠道蠕动、消化酶、免疫反应、内源微生物及产生的抗菌物质，同时也受到 日粮成分的影响，如高纤维日粮可引起纤维分解菌增加，本发明中添加菊粉 正是由于这一点。

本实施例制备的肉鸡饲料添加剂，基于以上的理论依据及研究基础，具 有一定的科学依据。

该肉鸡饲料添加剂由达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物和菊粉按 质量比混合组成，其中，达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物占80%，菊 粉占20%。

在本实施例中，以生产2.6kg的肉鸡饲料添加剂为例，制备方法如下：

1）达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物的制备：

步骤一，取尖叶胡枝子与达乌里胡枝子草粉各10kg，混均匀置入提取 罐内，加质量百分数70%的乙醇200L后搅拌，浸提48小时后浓缩。

步骤二，将浓缩液用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯部与水部。将所得的 乙酸乙酯部减压浓缩，干燥，粉碎。得到乙酸乙酯部0.85kg。

步骤三，将步骤二得到的水部用正丁醇萃取，得到正丁醇部与水部。将 所得到的正丁醇部减压浓缩，干燥，粉碎，得到正丁醇部1.23kg。

步骤四，将步骤二得到的乙酸乙酯部与步骤三得到的正丁醇部混合搅 拌，得到达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物2.08kg。

2）称取菊粉0.52kg，达乌里胡枝子与尖叶胡枝子混合提取物2.08kg， 混合均匀，即得2.6kg肉鸡饲料添加剂。

以下是申请人给出的采用本实施例的肉鸡饲料添加剂所进行的肉鸡饲 养试验：

1、试验动物与日粮

选用1日龄的Avian肉仔鸡150只，公母各半，基础日粮参照NRC（1994） 配制，配方及营养水平见表1。

2、试验设计与饲养管理

将150只1日龄的Avian肉仔鸡随机分为3个处理组，每个处理组5个重复， 每个重复10只鸡。其中：

空白组（CK）饲喂基础日粮；

对照组在基础日粮中添加3%（重量）的北京某公司生产的饲料添加剂；

试验组在基础日粮中添加3%（重量）本发明的肉鸡专用添加剂。

饲养期为6周，分2个阶段（0～3周龄和4～6周龄）。试验肉鸡双层笼养， 自由采食和饮水，控制舍内温度、湿度和光照，卫生学指标符合鸡的卫生要 求。7日龄进行新城疫弱毒苗首免，14日龄进行法氏囊疫苗饮水免疫，21日 龄新城疫弱毒苗加强免疫。

3、样品采集

在6周末饲养试验结束时，每个处理随机抽取5只接近平均体质量的试验 鸡（每个重复1只）屠宰，测定屠体性状指标，心脏采血15mL分离血清，备 用；同时采心、肝和肾组织研磨，以生理盐水稀释成10%组织匀浆，3000r/min 离心10min，取上清液，-20℃保存。

4、测定指标及方法

生产性能测定：按照常规方法测定平均日增质量和料肉比。

抗氧化指标测定：血清和组织匀浆中超氧化物岐化酶（T-SOD）活性测 定采用黄嘌呤氧化物酶法，谷胱甘肽还原酶（GR）活性采用NADPH法，丙二 醛（MDA）含量测定采用硫代巴比妥酸法（TBA），组织匀浆蛋白质测定采用 考马斯亮兰法（CBB），试验所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所， 在紫外分光光度计（UV-2401PC，SHIMADZU）上进行测定。测定过程完全按 试剂盒说明书进行操作。

免疫器官指标测定：

免疫器官指数＝免疫器官重mg/活重g；

5、统计分析

采用SPSS统计软件ANOVA进行显著性分析，并采用Duncan氏法进行多重 比较。测定结果以“平均值±标准误”表示。

表1：肉仔鸡基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1）预混料可为每kg全价料提供：铜（Cu）：12.8mg；铁（Fe）：99mg； 锌（Zn）：47mg；锰（Mn）：86mg；硒（Se）：0.30mg；碘（I）：0.50mg；VA： 20000IU；VD3：4400IU；VE：16mg；VK3：2mg；VB1：1.2mg；VB2：6mg；VB6： 4.8mg；VB12：0.012mg；叶酸：0.4mg；烟酸：20mg；D-泛酸钙：10mg；D-生 物素（D-biotin）：0.06mg；乙氧基喹啉：0.2mg。

试验结果如下：

1、对生产性能的影响

表2：达乌里胡枝子提取物对肉仔鸡生产性能的影响（n＝5)

处理组 日增重g 料肉比 出栏重（kg） 死淘率 空白组 41.16±0.60a 1.87±0.02 1．98 5．1 对照组 41.56±0.19ab 1.82±0.01 2．07 2．3 试验组 42.65±1.60abc 1.76±0.03 2．29 1．53

由表2可知，在整个试验期内（0～6周），添加达乌里胡枝子提取物对 肉仔鸡日增重有促进作用，对料肉比有降低趋势，但是差异不显著（P＞ 0.05）。但试验组比空白组日增重提高了3.6%，且试验组的死淘率明显降低。

2、对肉鸡抗氧化指标的影响

表3：对肉鸡血清和组织中T-SOD（n＝5)

处理组 血清（U.mL-1） 心脏（U.mg-1） 肝脏（U.mg-1） 肾脏（U.mg-1） 空白 284.03±9.60a 332.89±9.66a 307.03±5.62a 205.23±9.26a 对照组 356.23±20.19b 419.79±12.44b 363.60±5.52bc 270.52±6.85c 试验组 361.31±12.30b 446.68±11.20b 379.47±8.22bc 278.65±9.32c

由表3可知，对照组与试验组对肉仔鸡血清T-SOD活性有增强作用，与空 白组相比差异显著（P＜0.05），试验组可显著提高肉仔鸡心脏、肝脏和肾 脏T-SOD活性，试验组T-SOD均高于对照组但差异不显著（P＞0.05）。

表4：对肉鸡血清和组织GR的影响

由表可知，试验组中肉鸡血清GR活力高于空白组与对照组，且差异显著 （P＜0.05）；试验组肉仔鸡心脏GR活力均高于空白组及对照组，但与对照 组相比差异不显著；试验组肉仔鸡肝脏GR活力均高于空白组与对照组，但差 异不显著（P＞0.05）；试验组肉仔鸡肾脏GR活力高于对照组与空白组，且 差异显著（P＜0.05）。

表5：对肉鸡血清和组织MDA的影响

由表可知，对照组与试验组肉鸡血清中MDA含量均显著低于空白组，差异 显著（P＜0.05）；试验组肉鸡心脏、肾脏中的MDA含量均低于对照组但差 异不显著，试验组肝脏中MDA含低于对照组。差异显著（P＜0.05）。

表6：达乌里胡枝子提取物对肉仔鸡免疫器官指数的影响（mg/g）

免疫器官指数是目前研究机体免疫体况的方法之一，一般认为免疫器官 重量降低为免疫抑制所致，而免疫器官重量增加则为免疫增强的表现，由表 4可知：与对空白组相比，无论3周龄还是6周龄时，试验组对肉仔鸡胸腺指 数、脾脏指数及法氏囊指数有提高作用较空白组与对照组明显。说明此专用 添加剂对肉仔鸡免疫器官的重量有增加趋势，在一定程度上能增加肉鸡的免 疫力。

通过以上试验结果表明：采用本实施例的肉鸡添加剂，对肉鸡生长、抗 氧化及增强免疫等均有显著的作用，效果好于市售的饲料添加剂。

本文标签： 肉鸡饲料添加剂