一种利用锁阳粉养殖羊的方法及其羊肉品质的测定方法

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本发明公开了一种利用锁阳粉养殖羊的方法及其羊肉品质的测定方法，属于家禽养殖及测定技术领域。锁阳粉养殖羊的方法为选取健康无病的羊以撒有锁阳粉的干草为饲料进行养殖。利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，包括羊肉氨基酸的测定和羊肉脂肪酸组成的测定。本发明通过撒有锁阳粉的干草并开发了以撒有锁阳粉的干草为饲料的羊的羊肉的测定方法，不但提高了羊肉的品质，还可以对羊肉的品质进行精确分析，克服了传统羊在养殖时对羊肉的品质无法断定且品质不高的缺陷。

1.一种利用锁阳粉养殖羊的方法，其特征在于：选取健康无病的羊以撒有锁阳粉的干草为饲料进行养殖。 2.一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：包括羊肉氨基酸的测定和羊肉脂肪酸组成的测定，氨基酸的测定，步骤一：称取适量样品，在65℃烘箱内烘至恒重后，将脱水脱脂的样品进行粉碎后准确称取30mg，放入水解管中，加6mol/L盐酸15mL，抽真空封口；在110℃的恒温干燥箱内水解22-24h；过滤至50mL容量瓶，并用去离子水定容。吸取1mL滤液，减压蒸干，最后用0.02mol/L盐酸定容至一定体积；步骤二：采用全自动氨基酸分析仪测定；分别计算其氨基酸评分(AAS)、氨基酸比值系数(RC)、变异系数(CV)和氨基酸比值系数(SRC)等值，并对其营养价值作评价；羊肌肉中必需氨基酸AAS评分、RC系数、CV系数和SRC系数分别按以下公式计算：SRC＝100-CV×100羊肉脂肪酸组成的测定，步骤一：称取适量肉样，用滤纸包好，装入索氏抽提器，用无水乙醚提取肉样中脂肪，旋转蒸发除去乙醚；在提取的脂肪中加入25mL体积1mol/L的NaOH-乙醇混合溶液，置于80℃水浴加热回流1h，进行脂肪的皂化，完成后再次进行旋转蒸发，以除去乙醇；如果没有能够皂化的物质较多，将生成的肥皂溶于10mL蒸馏水中，加入乙醚10mL，用分液漏斗提取下层，可重复此步骤多次直至完全除去没有能够皂化的物质；将提取的水相pH值调至2.0，由此从皂化了的物质中游离出脂肪酸；然后用20mL石油醚提取脂肪酸，重复此操作2次，再次旋转蒸发去除石油醚；步骤二：在提取的脂肪酸上加入4％的HCl-甲醇30mL于60℃水浴上加热30min；冷却至室温，分别加入20mL的正己烷和5mL的蒸馏水后摇匀，待分层，取其上清液，旋转蒸发除去正己烷，再加入10mL正己烷，分层后取其上清液并合并于一起；用无水NaSO干燥、密封冷藏，留待进行GC-MS分析；采用归一化定量法计算羊肉样品中各脂肪酸组分在其总脂肪酸中所占的质量百分比，羊肌肉脂肪各脂肪酸组分含量按以下公式计算：最后对补饲锁阳和未补饲锁阳的羊不同部位肌肉品质进行方差分析，用Duncan氏法进行多重比较，试验数据以平均值±标准差(X±SD)表示。 3.根据权利要求2所述的一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：所述的测定方法还包括对羊肉的pH值的测定、颜色的测定、失水率的测定、系水率的测定、熟肉率的测定、剪切力的测定、胶原蛋白的测定、水分含量的测定、粗蛋白质的测定、粗脂肪的测定、粗灰分的测定、羊肉矿物质的测定和羊肉维生素的测定。 4.根据权利要求3所述的一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：所述的pH值的测定为分别取羊肉背最长肌(LD)、股二头肌(BF)、臂三头肌(TB)3个部位肉，在肌肉横切面上用小刀刺出一个孔，然后将pH值直测仪插入所刺出的孔内胴体肌肉，读数即可。 5.根据权利要求3所述的一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：所述失水率的测定为称取一定的肉样置于离心管中，以1500r/min的转速离心30min，完成后取出肉样，用虑纸吸干表面水分后称重，肉样失水率为离心后失去的水分与离心前肉样重量之比，羊肌肉失水率按公式计算 6.根据权利要求3所述的一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：所述系水率的测定用直接干燥法测定得到的肉样水分含量， 7.根据权利要求3所述的一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：所述熟肉率的测定为分别取背最长肌(LD)、股二头肌(BF)、臂三头肌(TB)3个部位肉各约30g左右，去除附于肌外膜上的脂肪后称重，将称好重的肉样放于锅中蒸煮30min，然后取出并冷却至室温，用虑纸吸干表面水分后再称一次其重量，熟肉率计算公式如下： 8.根据权利要求3所述的一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：所述剪切力的测定为肉样去除表面结缔组织及其脂肪后，切成2.5cm厚，称重并真空包装，置于水浴锅使肉样里面的温度达到80℃左右后取出冷却至室温，用滤纸吸干表面水分，称重；然后将肉样放入4℃冰箱中过夜，第二天，顺着肉样的纹理切成1cm厚，用肌肉嫩度计测定其剪切力值，并在每个样品测试多次，并选取比较接近的值作平均，即可得到羊肌肉剪切力值。 9.根据权利要求3所述的一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征在于：所述胶原蛋白的测定为用分光光度计测定出肉样和羟脯氨酸标准溶液在558nm处的吸光值，用测得的羟脯氨酸标准溶液吸光值作y轴，用与其所对应的羟脯氨酸标准溶液浓度作x轴绘制标准曲线，算出阿拉上羊肌肉所测得的吸光值所对应的羟脯氨酸浓度，代入以下公式即可得出得到羊肌肉中羟脯氨酸含量后将数值再乘以陆生动物的换算系数7.1，即可得到羊肌肉中胶原蛋白含量。

技术领域

本发明属于家禽养殖技术领域，尤其与一种利用锁阳粉养殖羊的方法及其羊肉品质的测定方法有关。

背景技术

近年来，随着人们生活水平的提高以及健康意识的增强，消费者对膳食的需求逐渐由数量向质量转变。羊肉因其所含胆固醇较低、营养丰富、味美多汁，被看作是一种理想的保健食品。不同的饲料组成可以影响动物采食量和生理代谢机能，进而影响肉品品质。饲喂营养充足的饲料，可以让羊更好地生长，还能避免很多疾病的发生。本专利申请人研究开发了一种利用锁阳粉养殖羊的方法及其羊肉品质的测定方法，旨在克服羊肉品质存在的缺陷。

发明内容

根据上述背景技术存在的问题，本发明的目的旨在提供一种羊肉品质好的利用锁阳粉养殖羊的方法及其羊肉品质的测定方法。

为此，本发明采用以下技术方案：一种利用锁阳粉养殖羊的方法，其特征是，选取健康无病的羊以撒有锁阳粉的干草为饲料进行养殖。

一种利用锁阳粉养殖羊的羊肉的测定方法，其特征是，包括羊肉氨基酸的测定和羊肉脂肪酸组成的测定，

氨基酸的测定，步骤一：称取适量样品，在65℃烘箱内烘至恒重后，将脱水脱脂的样品进行粉碎后准确称取30mg，放入水解管中，加6mol/L盐酸15mL，抽真空封口；在110℃的恒温干燥箱内水解22-24h；过滤至50mL容量瓶，并用去离子水定容。吸取1mL滤液，减压蒸干，最后用0.02mol/L盐酸定容至一定体积；步骤二：采用全自动氨基酸分析仪测定；分别计算其氨基酸评分(AAS)、氨基酸比值系数(RC)、变异系数(CV)和氨基酸比值系数(SRC)等值，并对其营养价值作评价；羊肌肉中必需氨基酸AAS评分、RC系数、CV系数和SRC系数分别按以下公式计算：

SRC＝100-CV×100

羊肉脂肪酸组成的测定，步骤一：称取适量肉样，用滤纸包好，装入索氏抽提器，用无水乙醚提取肉样中脂肪，旋转蒸发除去乙醚；在提取的脂肪中加入25mL体积1mol/L的NaOH-乙醇混合溶液，置于80℃水浴加热回流1h，进行脂肪的皂化，完成后再次进行旋转蒸发，以除去乙醇；如果没有能够皂化的物质较多，将生成的肥皂溶于10mL蒸馏水中，加入乙醚10mL，用分液漏斗提取下层，可重复此步骤多次直至完全除去没有能够皂化的物质；将提取的水相pH值调至2.0，由此从皂化了的物质中游离出脂肪酸；然后用20mL石油醚提取脂肪酸，重复此操作2次，再次旋转蒸发去除石油醚；

步骤二：在提取的脂肪酸上加入4％的HCl-甲醇30mL于60℃水浴上加热30min；冷却至室温，分别加入20mL的正己烷和5mL的蒸馏水后摇匀，待分层，取其上清液，旋转蒸发除去正己烷，再加入10mL正己烷，分层后取其上清液并合并于一起；用无水Na2SO4干燥、密封冷藏，留待进行GC-MS分析；

采用归一化定量法计算羊肉样品中各脂肪酸组分在其总脂肪酸中所占的质量百分比，羊肌肉脂肪各脂肪酸组分含量按以下公式计算：

最后对补饲锁阳和未补饲锁阳的羊不同部位肌肉品质进行方差分析，用Duncan氏法进行多重比较，试验数据以平均值±标准差(X±SD)表示。

作为对上述技术方案的补充和完善，本发明还包括以下技术特征。

所述的测定方法还包括对羊肉的pH值的测定、颜色的测定、失水率的测定、系水率的测定、熟肉率的测定、剪切力的测定、胶原蛋白的测定、水分含量的测定、粗蛋白质的测定、粗脂肪的测定、粗灰分的测定、羊肉矿物质的测定和羊肉维生素的测定。

所述的pH值的测定为分别取羊肉背最长肌(LD)、股二头肌(BF)、臂三头肌(TB)3个部位肉，在肌肉横切面上用小刀刺出一个孔，然后将pH值直测仪插入所刺出的孔内胴体肌肉，读数即可。

所述失水率的测定为称取一定的肉样置于离心管中，以1500r/min的转速离心30min，完成后取出肉样，用虑纸吸干表面水分后称重，肉样失水率为离心后失去的水分与离心前肉样重量之比，羊肌肉失水率按公式计算

所述系水率的测定用直接干燥法测定得到的肉样水分含量，

所述熟肉率的测定为分别取背最长肌(LD)、股二头肌(BF)、臂三头肌(TB)3个部位肉各约30g左右，去除附于肌外膜上的脂肪后称重，将称好重的肉样放于锅中蒸煮30min，然后取出并冷却至室温，用虑纸吸干表面水分后再称一次其重量，熟肉率计算公式如下：

所述剪切力的测定为肉样去除表面结缔组织及其脂肪后，切成2.5cm厚，称重并真空包装，置于水浴锅使肉样里面的温度达到80℃左右后取出冷却至室温，用滤纸吸干表面水分，称重；然后将肉样放入4℃冰箱中过夜，第二天，顺着肉样的纹理切成1cm厚，用肌肉嫩度计测定其剪切力值。并在每个样品测试多次，并选取比较接近的值作平均，即可得到羊肌肉剪切力值。

所述胶原蛋白的测定为用分光光度计测定出肉样和羟脯氨酸标准溶液在558nm处的吸光值。用测得的羟脯氨酸标准溶液吸光值作y轴，用与其所对应的羟脯氨酸标准溶液浓度作x轴绘制标准曲线，算出阿拉上羊肌肉所测得的吸光值所对应的羟脯氨酸浓度，代入以下公式即可得出羊肌肉中羟脯氨酸含量

得到羊肌肉中羟脯氨酸含量后将数值再乘以陆生动物的换算系数7.1，即可得到羊肌肉中胶原蛋白含量。

使用本发明可以达到以下有益效果：本发明通过撒有锁阳粉的干草并开发了以撒有锁阳粉的干草为饲料的羊的羊肉的测定方法，不但提高了羊肉的品质，还可以对羊肉的品质进行精确分析，克服了传统羊在养殖时对羊肉的品质无法断定且品质不高的缺陷。

具体实施方式

实施例1：首选试验所用羊肉采自内蒙古阿拉善右旗，随机选取健康无病的羊，其中试验组(共3只羊)以撒有锁阳粉的干草为饲料，对照组(共1只羊)以干草为饲料。每只羊屠宰后，分别取其背最长肌(Longissimus Dorsi，LD)、股二头肌(Biceps Femoris，BF)和臂三头肌(Triceps Brachii，TB)各500g，装进采样袋、标记、冷冻保藏(-20℃)后运至实验室待测。

pH值的测定：宰后分别取背最长肌(LD)、股二头肌(BF)、臂三头肌(TB)3个部位肉，在肌肉横切面上用小刀刺出一个孔，然后将pH值直测仪插入所刺出的孔内胴体肌肉，读数即可。

颜色的测定：肉色采用全自动测色色差计测定。通常采用Hunter值，L*：代表亮度，L*＝100时为最亮，L*＝0时为最暗；a*：代表红度，a*通常大于0的时候，值越大则肌肉颜色越红；b*：代表黄度，b*通常大于0的时候，值越大则肌肉颜色越黄；色度值(C值)可由肌肉红度值(a*)和黄度值(b*)计算得到，C值越高则肌肉颜色越鲜艳，计算公式：C＝(a*2+b*2)1/2

失水率的测定：精确称取一定的肉样置于离心管中，以1500r/min的转速离心30min，完成后取出肉样，用虑纸吸干表面水分后称重，肉样失水率为离心后失去的水分与离心前肉样重量之比。阿拉善羊肌肉失水率按公式计算

系水率的测定：阿拉善羊肌肉的系水率以公式计算，其中含水率为参照GB/T5009.3-2010，用直接干燥法测定得到的肉样水分含量。

熟肉率的测定：分别取背最长肌(LD)、股二头肌(BF)、臂三头肌(TB)3个部位肉各约30g左右，去除附于肌外膜上的脂肪后称重，将称好重的肉样放于锅中蒸煮30min，然后取出并冷却至室温，用虑纸吸干表面水分后再称一次其重量。阿拉善羊肌肉的熟肉率计算公式：

剪切力的测定：肉样去除表面结缔组织及其脂肪后，切成2.5cm厚，称重并真空包装，置于水浴锅使肉样里面的温度达到80℃左右后取出冷却至室温，用滤纸吸干表面水分，称重。然后将肉样放入4℃冰箱中过夜，第二天，顺着肉样的纹理切成1cm厚，用肌肉嫩度计测定其剪切力值。每个样品多测上几次，并选取比较接近的值作平均，即可得到阿拉善羊肌肉剪切力值

胶原蛋白的测定：参照GB/T 9695.23–2008肉与肉制品中羟脯氨酸的测定方法，用分光光度计测定出肉样和羟脯氨酸标准溶液在558nm处的吸光值。用测得的羟脯氨酸标准溶液吸光值作y轴，用与其所对应的羟脯氨酸标准溶液浓度作x轴绘制标准曲线。算出阿拉上羊肌肉所测得的吸光值所对应的羟脯氨酸浓度，代入公式即可得出阿拉善羊肌肉中羟脯氨酸含量

水分含量的测定：参照GB/T5009.3-2010，用直接干燥法测定。

粗蛋白质的测定：参照GB/T5009.5-2010，用凯氏定氮法测定。

粗脂肪的测定：参照GB/T5009.6-2003，用索氏抽提法测定

粗灰分的测定：参照GB/T5009.4-2010，用高温灰化法测定

阿拉善羊肉矿物质的测定

钾、钠：参照GB/T5009.91-2003，用原子吸收分光光度法测定。

钙：参照GB/T5009.92-2003，用原子吸收分光光度法测定。

铜：参照GB/T5009.13-2003，用原子吸收分光光度法测定。

锌：参照GB/T5009.14-2003，用原子吸收分光光度法测定。

锰、铁、镁：参照GB/T5009.90-2003，用原子吸收分光光度法测定。

磷：参照GB/T5009.87-2003，用钼蓝法测定。

阿拉善羊肉维生素的测定

维生素A、维生素E:GB/T 5009.82-2003，用荧光光度法测定。

维生素B1:GB/T5009.84-2003，用荧光光度法测定。

维生素B2:GB/T5009.85-2003，用荧光光度法测定。

氨基酸的测定，步骤一：称取适量样品，在65℃烘箱内烘至恒重后，将脱水脱脂的样品进行粉碎后准确称取30mg，放入水解管中，加6mol/L盐酸15mL，抽真空封口；在110℃的恒温干燥箱内水解22-24h；过滤至50mL容量瓶，并用去离子水定容。吸取1mL滤液，减压蒸干，最后用0.02mol/L盐酸定容至一定体积；步骤二：采用全自动氨基酸分析仪测定；分别计算其氨基酸评分(AAS)、氨基酸比值系数(RC)、变异系数(CV)和氨基酸比值系数(SRC)等值，并对其营养价值作评价；羊肌肉中必需氨基酸AAS评分、RC系数、CV系数和SRC系数分别按以下公式计算：

SRC＝100-CV×100

羊肉脂肪酸组成的测定，步骤一：称取适量肉样，用滤纸包好，装入索氏抽提器，用无水乙醚提取肉样中脂肪，旋转蒸发除去乙醚；在提取的脂肪中加入25mL体积1mol/L的NaOH-乙醇混合溶液，置于80℃水浴加热回流1h，进行脂肪的皂化，完成后再次进行旋转蒸发，以除去乙醇；如果没有能够皂化的物质较多，将生成的肥皂溶于10mL蒸馏水中，加入乙醚10mL，用分液漏斗提取下层，可重复此步骤多次直至完全除去没有能够皂化的物质；将提取的水相pH值调至2.0，由此从皂化了的物质中游离出脂肪酸；然后用20mL石油醚提取脂肪酸，重复此操作2次，再次旋转蒸发去除石油醚；

步骤二：在提取的脂肪酸上加入4％的HCl-甲醇30mL于60℃水浴上加热30min；冷却至室温，分别加入20mL的正己烷和5mL的蒸馏水后摇匀，待分层，取其上清液，旋转蒸发除去正己烷，再加入10mL正己烷，分层后取其上清液并合并于一起；用无水Na2SO4干燥、密封冷藏，留待进行GC-MS分析；

采用归一化定量法计算羊肉样品中各脂肪酸组分在其总脂肪酸中所占的质量百分比，羊肌肉脂肪各脂肪酸组分含量按以下公式计算：

使用SPSS19.0统计软件对数据进行统计和处理，对补饲锁阳和未补饲锁阳的羊不同部位肌肉品质进行方差分析，用Duncan氏法进行多重比较。试验数据以平均值±标准差(X±SD)表示。

本发明的测定结果如下：

(1)补饲锁阳的阿拉善羊肉失水率、系水率、熟肉率、剪切力值、羟脯氨酸含量和胶原蛋白含量平均值分别为25.66％、65.78％、55.85％、4.40kg、0.16％和1.14％；未补饲锁阳的阿拉善羊肉失水率、系水率、熟肉率、剪切力值、羟脯氨酸含量和胶原蛋白含量平均值分别为29.34％、62.58％、55.56％、4.45kg、0.18％和1.31％。

(2)补饲锁阳的阿拉善羊肉水分、粗蛋白、粗灰分和粗脂肪含量平均值分别为75.03％、20.66％、1.81％和1.58％；未补饲锁阳的阿拉善羊肉水分、粗蛋白、粗灰分和粗脂肪含量平均值分别为74.61％、20.61％、1.77％和1.73％。阿拉善羊肉中矿物质含量较为丰富，钾含量最高(约为415.55mg/100g)，其次是磷含量(约为188.88mg/100g)。维生素A、B1、B2、E含量平均值分别为89.68μg/100g、13.43μg/100g、53.25μg/100g和0.19mg/100g。阿拉善羊肉中共检测出17种氨基酸，其中成人必需氨基酸7种，婴儿必需氨基酸2种；补饲锁阳的阿拉善羊肉中总氨基酸含量为18.17％，其中成人必需氨基酸含量为7.18％；未补饲锁阳的阿拉善羊肉中总氨基酸含量为18.26％，其中成人必需氨基酸含量为7.08％；其必需氨基酸接近理想模式，且种类齐全。阿拉善羊肉中共测出了20种脂肪酸，并由油酸(34.49％)、棕榈酸(22.79％)和硬脂酸(13.91％)为主；补饲锁阳的和未补饲锁阳羊肉总脂肪酸中饱和脂肪酸含量分别为41.42％和42.09％，单不饱和脂肪酸含量分别为44.61％和35.10％，多不饱和脂肪酸含量分别为10.21％和11.16％。

(3)补饲锁阳的和未补饲锁阳的两组阿拉善羊之间，肌肉食用品质中颜色值(a*值、b*值、C值)、失水率、熟肉率、羟脯氨酸和胶原蛋白含量有显著(P<0.05)差异，其它无显著差异(P>0.05)；营养成分中钾、钙、铜、磷、钠、维生素A和B1、缬氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸、胱氨酸、酪氨酸、总脂肪酸中的肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈油酸、十七烷酸、十七烷酸一烯酸、硬脂酸、反亚油酸、亚油酸等均有显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01)，其它无显著差异(P>0.05)。此外，补饲锁阳的羊肌肉中还测出了几种少量的，在未补饲锁阳的羊肌肉中未测出的几种脂肪酸：二十一烷酸、山嵛酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。

(4)补饲锁阳的羊不同部位肌肉之间，食用品质中颜色值(a*值、b*值、C值)、pH值、系水率、熟肉率、剪切力值、羟脯氨酸和胶原蛋白含量等均有显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01)，其它无显著差异(P>0.05)；营养成分中水分、脂肪、钙、锌、磷、维生素A、组氨酸、总脂肪酸中的棕榈酸、棕榈油酸、十七烷酸一烯酸、硬脂酸、反亚油酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸和山嵛酸含量等也均有显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01)，其它无显著差异(P>0.05)。此外，补饲锁阳的羊背最长肌中未测得二十二碳六烯酸(DHA)，而含少量于股二头肌和臂三头肌。

以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

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